Różnice między zwykłymi mikroskopami optycznymi a mikroskopami fluorescencyjnymi
Mikroskop optyczny: Jest to instrument optyczny wykorzystujący zasady optyczne do powiększania i obrazowania małych obiektów, których ludzkie oko nie może rozróżnić, w celu wydobycia informacji o ich mikrostrukturze.
Mikroskop fluorescencyjny: Mikroskop fluorescencyjny wykorzystuje światło ultrafioletowe jako źródło światła do napromieniowania badanego obiektu, powodując emisję fluorescencji, a następnie obserwuje kształt i położenie obiektu pod mikroskopem. Mikroskopia fluorescencyjna służy do badania absorpcji, transportu, dystrybucji i lokalizacji substancji w komórkach. Niektóre substancje w komórkach, takie jak chlorofil, mogą fluoryzować pod wpływem promieniowania ultrafioletowego; Istnieją również pewne substancje, które same nie mogą emitować fluorescencji, ale mogą również emitować fluorescencję, jeśli zostaną zabarwione barwnikami fluorescencyjnymi lub przeciwciałami fluorescencyjnymi i napromieniowane światłem ultrafioletowym. Mikroskopia fluorescencyjna jest jednym z narzędzi do badań jakościowych i ilościowych tego typu substancji.
Mikroskop optyczny składa się zazwyczaj ze stolika, systemu oświetlenia punktowego, soczewki obiektywu, okularu i mechanizmu ogniskującego. System oświetlenia punktowego może uzyskać różne metody obserwacji, takie jak punkty ciemnych obiektów na jasnym tle (tzw. oświetlenie jasnego pola) lub jasne punkty obiektu na ciemnym tle (tzw. oświetlenie ciemnego pola), zmieniając tryb oświetlenia, aby lepiej odkrywać i obserwować mikrostruktury w różnych sytuacjach.
Istnieją następujące różnice między mikroskopem fluorescencyjnym a zwykłym mikroskopem:
1. Metoda oświetlenia jest zwykle metodą opadającą, w której źródło światła jest rzutowane na próbkę przez soczewkę obiektywu;
2. Źródłem światła jest światło ultrafioletowe o krótszej długości fali i wyższej rozdzielczości niż zwykłe mikroskopy;
3. Istnieją dwa specjalne filtry, ten znajdujący się przed źródłem światła służy do odfiltrowywania światła widzialnego, a ten pomiędzy okularem a soczewką obiektywu służy do odfiltrowywania światła ultrafioletowego w celu ochrony ludzkiego oka.
Mikroskop fluorescencyjny jest również rodzajem mikroskopu optycznego, przy czym główną różnicą jest długość fali wzbudzenia. Określa to różnice w budowie i sposobach użycia mikroskopów fluorescencyjnych i zwykłych mikroskopów optycznych.
Mikroskop fluorescencyjny jest podstawowym narzędziem w chemii komórek immunofluorescencyjnych. Składa się z głównych elementów, takich jak źródło światła, układ płytek filtrujących i układ optyczny. Polega na użyciu światła o określonej długości fali w celu pobudzenia próbki do emisji fluorescencji, która jest następnie powiększana przez soczewkę obiektywu i system okularów w celu obserwacji obrazu fluorescencyjnego próbki.
