Metoda bezpośredniego liczenia mikroorganizmów przy użyciu mikroskopu
Powszechnie stosowaną metodą liczenia drobnoustrojów jest stosowanie hemocytometru do bezpośredniego zliczania mikroorganizmów pod mikroskopem. Zaletą tej metody jest jej intuicyjność i szybkość. Umieścić odpowiednio rozcieńczoną zawiesinę bakterii (lub zawiesinę zarodników) w komorze zliczania pomiędzy szkiełkiem hemocytometru a szkiełkiem nakrywkowym i zliczyć pod mikroskopem. Ze względu na stałą objętość pomieszczenia zliczania (0,1 mm2), całkowitą liczbę mikroorganizmów na jednostkę objętości można przeliczyć na podstawie liczby mikroorganizmów obserwowanych pod mikroskopem. Ze względu na to, że metoda ta oblicza sumę żywych i martwych komórek bakteryjnych, nazywana jest również metodą całkowitego zliczenia bakterii.
Płytka do liczenia krwinek to zazwyczaj specjalnie zaprojektowane szkiełko z czterema rowkami tworzącymi trzy platformy. Środkowa platforma jest podzielona na pół krótkim poziomym rowkiem, a po obu stronach platformy wygrawerowana jest siatka. Każda siatka jest podzielona na dziewięć dużych kwadratów, a duży kwadrat pośrodku to pomieszczenie do liczenia, w którym przeprowadza się liczenie drobnoustrojów. Budowę płytki do liczenia krwinek pokazano na rycinie VIII-1.
Ogólnie rzecz biorąc, istnieją dwie specyfikacje dotyczące skali pokoju przeliczeniowego. Po pierwsze, duży kwadrat jest podzielony na 16 środkowych kwadratów, a każdy środkowy kwadrat jest dalej podzielony na 25 małych kwadratów (Rysunek VIII -2); Inną metodą jest podzielenie dużego kwadratu na 25 środkowych kwadratów, a każdy środkowy kwadrat dzieli się dalej na 16 małych kwadratów (Rysunek VIII -1, C). Jednak niezależnie od wielkości planszy liczba małych kwadratów w każdym dużym kwadracie jest taka sama, czyli 16 × 25=400 małych kwadratów, jak pokazano na rysunku VIII-2.
Jeśli długość boku każdego dużego kwadratu wynosi 1 mm, pole każdego dużego kwadratu wynosi 1 mm2. Po przykryciu szkiełkiem nakrywkowym wysokość pomiędzy szkiełkiem nakrywkowym a szkiełkiem nakrywkowym wynosi 0,1 mm, zatem objętość pomieszczenia liczącego wynosi 0,1 mm3.
Podczas liczenia zwykle liczy się całkowitą liczbę bakterii w pięciu kwadratach, a następnie uzyskuje się średnią wartość każdego kwadratu. Mnożenie przez 16 lub 25 daje całkowitą liczbę bakterii w dużym kwadracie, którą następnie przelicza się na całkowitą liczbę bakterii w 1 ml roztworu bakteryjnego.
