Podstawowa obsługa mikroskopu fluorescencyjnego
A. Wyłącz światła w pokoju i włącz lampę rtęciową mikroskopu;
B. Wybierz odpowiedni filtr zgodnie z oznaczeniem fluoresceiny w próbce;
C. Umieść próbkę i znajdź odpowiednie pole widzenia;
D. Jeśli chcesz robić zdjęcia, potwierdź, że kolorowy film jest zainstalowany w aparacie;
mi. Włącz urządzenie Selfie, wybierz ręczny bieg, zwykle prędkość fotografowania wynosi 0.5-10 sekund;
F. Po użyciu wyłącz zasilanie i zapisz użycie. the
the
3. Metoda rejestracji obrazu fluorescencyjnego
Obraz fluorescencyjny widziany przez mikroskop fluorescencyjny ma zarówno cechy morfologiczne, jak i kolor i jasność fluorescencji. Oceniając wyniki, należy je połączyć, aby uzyskać kompleksową ocenę. Wyniki rejestrowane są na podstawie wskaźników subiektywnych, czyli obserwacji wzrokowej pracowników. Jako ogólna obserwacja jakościowa, zasadniczo wiarygodna. Wraz z rozwojem technologii i nauki do rejestrowania wyników ocen w różnym stopniu stosuje się obiektywne wskaźniki, takie jak spektrofotometry komórkowe, analizatory obrazu i inne instrumenty. Jednak wyniki rejestrowane przez te instrumenty muszą być również połączone z subiektywnymi ocenami. the
Fotografia z mikroskopu fluorescencyjnego jest bardzo potrzebna do rejestrowania obrazów fluorescencyjnych. Ponieważ fluorescencja jest łatwa do wyblaknięcia i osłabienia, konieczne jest rejestrowanie wyników w czasie rzeczywistym. Metoda jest zasadniczo taka sama, jak w przypadku zwykłej fotomikrografii. Wystarczy użyć filmu światłoczułego o dużej szybkości. Ponieważ światło ultrafioletowe ma silny wpływ na wygaszanie fluorescencji, takie jak markery FITC, jasność fluorescencji zmniejszy się o 50 procent po napromieniowaniu światłem ultrafioletowym przez 30 sekund. Dlatego też, jeśli szybkość naświetlania jest zbyt mała, nie można wykonać zdjęcia fluorescencyjnego. Mikroskopy fluorescencyjne do badań ogólnych posiadają półautomatyczny lub w pełni automatyczny system fotomikrografii. the
the
4. Środki ostrożności przy korzystaniu z mikroskopii fluorescencyjnej
A. Działaj ściśle zgodnie z wymaganiami instrukcji fabrycznych mikroskopu fluorescencyjnego i nie zmieniaj dowolnie programu. the
B. Kontrolę należy przeprowadzić w ciemnym pomieszczeniu. Po wejściu do ciemni podłącz zasilanie i zapal ultrawysokociśnieniową lampę rtęciową na 5-15 minut. Po ustabilizowaniu się silnego światła ze źródła światła oczy całkowicie przystosowują się do ciemni, a następnie rozpoczynają obserwację preparatu. the
C. Aby zapobiec uszkodzeniu oczu przez promienie ultrafioletowe, podczas regulacji źródła światła noś okulary ochronne. the
D. Czas inspekcji to najlepiej 1-2 godzin za każdym razem. Jeśli przekroczy 90 minut, intensywność światła ultrawysokociśnieniowej lampy rtęciowej będzie stopniowo spadać, a fluorescencja będzie słabnąć; po naświetleniu próbki światłem ultrafioletowym przez 3-5 minut fluorescencja również ulegnie znacznemu osłabieniu; dlatego nie powinien przekraczać najwyżej 2-3 godzin. . the
mi. Żywotność źródła światła mikroskopu fluorescencyjnego jest ograniczona, a próbki należy sprawdzać centralnie, aby zaoszczędzić czas i chronić źródło światła. Gdy jest gorąco, należy dodać wentylatory, aby rozproszyć ciepło, a nowe żarówki należy rejestrować od początku ich czasu użytkowania. Jeśli chcesz użyć jej ponownie po zgaszeniu lampy, przed jej zapaleniem musisz odczekać, aż żarówka wystarczająco ostygnie. Unikaj zapalania źródła światła kilka razy dziennie. the
F. Obserwować preparat natychmiast po barwieniu, ponieważ z czasem fluorescencja będzie stopniowo słabnąć. Jeśli próbka jest przechowywana w plastikowym worku polietylenowym w temperaturze 4 stopni, czas osłabienia fluorescencji może zostać opóźniony, a środek zamykający nie odparuje. the
G. Standard oceny jasności fluorescencji: jest ogólnie podzielony na cztery poziomy, to znaczy „-” oznacza brak lub słabą fluorescencję. „plus” oznacza, że zaobserwowano tylko wyraźnie widoczną fluorescencję. „plus plus” oznacza, że widoczna jest jasna fluorescencja. „plus plus plus” oznacza widoczną jasną fluorescencję.
