Jak sprawdzić powiększenie okularu i obiektywu mikroskopu świetlnego
Powiększenie mikroskopu optycznego jest iloczynem powiększenia soczewki obiektywu i powiększenia okularu, np. jeśli soczewka obiektywu wynosi 10×, a okular 10×, powiększenie wyniesie 10×10=100 .
Obiektyw.
1. Klasyfikacja soczewek obiektywowych:
Soczewki obiektywowe można podzielić na soczewki suche i soczewki immersyjne w zależności od różnych warunków użytkowania; które można podzielić na soczewki obiektywowe immersyjne i olejkowe (powszechnie stosowane powiększenie 90-100 razy).
W zależności od różnych powiększeń można je podzielić na obiektywy o małym powiększeniu (poniżej 10 razy), obiektywy o średnim powiększeniu (około 20 razy) i obiektywy o dużym powiększeniu (40-65 razy).
Zgodnie z korekcją aberracji dzieli się ją na achromatyczną soczewkę obiektywową (powszechnie używaną, może korygować aberrację chromatyczną dwóch kolorów światła w widmie soczewki obiektywowej) i złożoną soczewkę obiektywową z aberracją chromatyczną (może korygować aberrację chromatyczną trzech kolorów światła w widmie obiektywu, cena jest wysoka, zużycie mniejsze).
2. Główne parametry obiektywu:
Do głównych parametrów obiektywu zalicza się: powiększenie, aperturę numeryczną oraz odległość roboczą.
①, powiększenie to stosunek wielkości obrazu widzianego przez oko do wielkości odpowiadającej mu próbki. Odnosi się to raczej do stosunku długości niż powierzchni. Na przykład powiększenie 100× oznacza, że długość próbki wynosi 1 μm, a długość powiększonego obrazu wynosi 100 μm. Jeśli powiększenie jest obliczane na podstawie powierzchni, obraz jest powiększany 10-krotnie,000.
Całkowite powiększenie mikroskopu jest równe iloczynowi powiększenia obiektywu i okularu.
Apertura numeryczna, zwana także współczynnikiem apertury lustra, w skrócie NA lub A, jest głównym parametrem obiektywu i kondensora i jest wprost proporcjonalna do zdolności rozdzielczej mikroskopu. Apertura numeryczna obiektywu suchego wynosi 0.05-0.95, a apertura numeryczna obiektywu immersyjnego (olejek cedrowy) wynosi 1,25.
(iii) Odległość robocza to odległość od spodu przedniej soczewki obiektywu do górnej krawędzi szkiełka nakrywkowego preparatu, gdy obserwowany preparat jest najczystszy. Odległość robocza obiektywu i ogniskowa obiektywu, im dłuższa ogniskowa obiektywu, tym mniejsze powiększenie, tym dłuższa jest jego odległość robocza. Przykład: 10obiektyw oznaczony jako 10/0.25 i 160/0.17, z czego 10 do powiększania obiektyw; 0,25 dla apertury numerycznej; 160 na długość tubusu obiektywu (jednostka mm); 0,17 dla standardowej grubości szkiełka nakrywkowego (jednostka mm). 10-krotność efektywnej odległości roboczej obiektywu dla 6,5 mm, 40-krotność efektywnej odległości roboczej obiektywu dla 0,48 mm.
3, rolą obiektywu jest powiększenie preparatu po raz pierwszy, a najważniejszym elementem jest określenie działania mikroskopu - rozdzielczości poziomu.
Zdolność rozdzielcza nazywana jest także rozdzielczością lub zdolnością rozdzielczą. Wielkość zdolności rozdzielczej służy do określenia odległości (można określić minimalną odległość między dwoma punktami) wartości reprezentacji. W odległości wizualnej (25 cm) normalne ludzkie oko widzi dwa punkty obiektu 0.0od siebie oddalone o 73 mm, co stanowi wartość 0,073 mm, czyli normalną odległość rozdzielczą ludzkiego oka. Im mniejsza odległość rozdzielcza mikroskopu, tym większa jest jego zdolność rozdzielcza, to znaczy lepsza jego wydajność.
Wielkość zdolności rozdzielczej mikroskopu zależy od zdolności rozdzielczej soczewki obiektywu, która jest określona przez jej aperturę numeryczną i długość fali światła oświetlającego.
W przypadku stosowania zwykłej metody centralnego oświetlenia (aby światło równomiernie przechodziło przez próbkę metodą oświetlenia jasnym światłem), odległość rozdzielcza mikroskopu dla d=0.61λ / NA
Gdzie d - odległość rozdzielcza obiektywu, w nm.
λ – długość fali światła oświetlającego, w nm.
NA - apertura numeryczna obiektywu
Na przykład apertura numeryczna obiektywu olejkowego wynosi 1,25, zakres długości fal światła widzialnego to 400-700 nm, średnia długość fali to 550 nm, a następnie d=270 nm, około połowę długości fali światła oświetlającego. Generalnie granica zdolności rozdzielczej mikroskopu oświetlonego światłem widzialnym wynosi 0,2 µm.
