Wprowadzenie do mikroskopii z kontrastem fazowym
Mikroskop z kontrastem fazowym to mikroskop, który przekształca różnicę fazową (lub różnicę zakresu optycznego) powstającą, gdy światło przechodzi przez obiekt, na zmianę amplitudy (natężenia światła). Stosowany jest głównie do obserwacji żywych komórek, niezabarwionych skrawków tkanek lub wybarwionych próbek pozbawionych kontrastu.
Ludzkie oko może rozpoznać jedynie zmiany długości fali (koloru) i amplitudy światła widzialnego, ale nie zmiany fazy. Większość próbek biologicznych jest wysoce przezroczysta, a amplituda fali świetlnej pozostaje w zasadzie niezmieniona po jej przejściu i występuje jedynie zmiana fazy.
Mikroskopia z kontrastem fazowym zasadniczo zamienia różnicę zakresu optycznego światła widzialnego przechodzącego przez próbkę na różnicę amplitudy, co poprawia kontrast między różnymi strukturami i sprawia, że różne struktury są wyraźnie widoczne. Światło przechodzące przez próbkę po załamaniu odchylone od pierwotnej ścieżki światła, z opóźnieniem o 1/4 λ (długość fali), jeśli następnie zwiększy się lub zmniejszy o 1/4 λ, różnica zakresu optycznego wyniesie 1/2 λ, obie wiązki oś fotosyntezy po zakłóceniu w celu wzmocnienia amplitudy wzrasta lub maleje w celu poprawy kontrastu.
Ze strukturalnego punktu widzenia mikroskop z kontrastem fazowym różni się od zwykłego mikroskopu optycznego:
1. przysłona pierścieniowa z pierścieniowym otworem przysłony, instalowana pomiędzy źródłem światła a koncentratorem, której zadaniem jest skierowanie światła przez koncentrator do postaci pustego w środku stożka światła skupiającego się na preparacie.
2. Mikroskop z kontrastem fazowym w obiektywie wewnątrz, wzrost płytki fazowej pokrytej fluorkiem magnezu, rola światła bezpośredniego lub odbitego, opóźnienie fazowe 1/4 λ. Płytka fazowa ma dwa obszary: światło kieruje się przez część zwaną „powierzchnią sprzężoną”, a światło ugina się przez część zwaną „powierzchnią kompensacyjną”. Powierzchnia kompensacyjna”. Płytka fazowa dzieli się na dwa typy w zależności od efektu działania:
(1) Płytka fazowa A +: światło bezpośrednie opóźnione o 1/4 λ, dwie grupy fal świetlnych, współosiowa superpozycja fal świetlnych, wzrost amplitudy, struktura próbki jest jaśniejsza od otaczającego ośrodka, powstawanie jasnego kontrastu (lub kontrastu ujemnego) ).
(2) B + płytka fazowa: światło ugięte opóźnione o 1/4 λ, dwie grupy fal świetlnych po połączeniu osi redukcji fazy fali świetlnej, amplituda staje się mniejsza, struktura próbki jest ciemniejsza niż otaczające media, powstawanie ciemnego kontrastu (lub kontrastu dodatniego). Obiektyw z płytką fazową nazywany jest obiektywem z kontrastem fazowym, często w obudowie obiektywu z napisem „Ph”.
