Wprowadzenie do tego, dlaczego potrzebny jest mikroskop konfokalny
1. Mikroskop optyczny został udoskonalony dzięki wysiłkom i ulepszeniom naszych wielkich poprzedników. W rzeczywistości konwencjonalne mikroskopy mogą w prosty i szybki sposób zapewnić nam piękne obrazy mikroskopowe. Jednakże nastąpiło wydarzenie, które wniosło rewolucyjną innowację do tego niemal doskonałego świata mikroskopów, a było wynalezieniem „laserowego skaningowego mikroskopu konfokalnego”. Cechą charakterystyczną tego nowego typu mikroskopu jest zastosowanie układu optycznego, który wyodrębnia informacje o obrazie jedynie z powierzchni, na której skupia się ostrość. Zmieniając ostrość i odtwarzając uzyskane informacje w pamięci obrazu, można uzyskać żywy obraz z pełną informacją 3D. Dzięki tej metodzie można łatwo uzyskać informacje o kształcie powierzchni, których nie można potwierdzić za pomocą konwencjonalnych mikroskopów. Dodatkowo dla typowych mikroskopów optycznych „poprawa rozdzielczości” i „pogłębienie głębi ogniskowej” to warunki sprzeczne, zwłaszcza przy dużych powiększeniach. Jednak w przypadku mikroskopów konfokalnych problem ten można łatwo rozwiązać.
Konfokalny układ optyczny zapewnia punktowe oświetlenie próbki, a odbite światło jest również odbierane przez czujnik punktowy. Po umieszczeniu próbki w ognisku prawie całe odbite światło może dotrzeć do fotoreceptora. Kiedy próbka odbiega od ogniska, odbite światło nie może dotrzeć do fotoreceptora. Oznacza to, że w konfokalnym układzie optycznym wysyłany będzie tylko obraz pokrywający się z ogniskiem, a światło punktowe i niepotrzebne rozproszone zostanie zablokowane.
W konfokalnym układzie optycznym próbka jest oświetlana punktowo, a światło odbite jest również odbierane przez czujnik punktowy. Niezbędne stają się więc punktowe źródła światła. Laser jest bardzo punktowym źródłem światła. W większości przypadków źródłem światła w mikroskopii konfokalnej jest źródło światła laserowego. Ponadto monochromatyczność, kierunkowość i doskonały kształt wiązki laserów są również ważnymi powodami ich powszechnego zastosowania.
