Metoda MERGE zdjęć z mikroskopu fluorescencyjnego
Często widzimy, że fotografie fluorescencyjne są prezentowane w artykułach jako połączone, jak pokazano poniżej. Łącząc, można rozróżnić, czy dwa (lub więcej) sygnały fluorescencyjne w tym samym miejscu tkanki lub komórki nakładają się, czy nie. Dzisiaj porozmawiamy o tym, jak połączyć zdjęcia z mikroskopu fluorescencyjnego.
1, podstawowa zasada
Podstawową zasadą jest ponowne obliczenie danych o kolorze tego samego piksela na dwóch (lub większej liczbie) zdjęć o tej samej wielkości zgodnie ze wzorem, aby uzyskać nowy kolor. Na przykład kolory czerwony i zielony na fotografii fluorescencyjnej nakładają się, tworząc kolor żółty. Algorytm ten opiera się na „trybie dodawania koloru” RGB (jak pokazano poniżej), a tryb łączenia warstw w programie Photoshop „usuwanie kolorów” jest prawie taki sam.
2, wprowadzenie oprogramowania
Dziś wprowadzamy badania naukowe w powszechnym oprogramowaniu: ImageJ, dzięki niemu łączenie zdjęć niż w Ps jest prostsze, bardziej bezpośrednie (nie przejmują się warstwami, tryb warstw).ImageJ nie wymaga instalacji, oprogramowanie może nawet otworzyć na dysku USB i używać.
Istnieją dwa sposoby łączenia zdjęć fluorescencyjnych: jeden polega na połączeniu ich za pomocą oprogramowania dołączonego do mikroskopu, a drugi polega na zapisaniu zdjęć fluorescencyjnych tego samego pola widzenia z różnymi światłami wzbudzającymi, a następnie połączeniu ich ze zwykłym oprogramowanie do przetwarzania obrazu (np. PS) podczas prezentacji wyników. Jeśli obawiasz się wygaszenia fluorescencji podczas patrzenia pod mikroskop fluorescencyjny (szczególnie przy zabarwieniu barwnikami fluorescencyjnymi), możesz szybko zrobić kilka zdjęć, a następnie wybrać te które są dobre, gdy wracamy. Jeśli patrząc pod mikroskopem fluorescencyjnym obawiasz się wygaszenia fluorescencji (szczególnie w przypadku barwienia barwnikiem fluorescencyjnym), możesz najpierw szybko zrobić kilka zdjęć, a następnie wrócić i połączyć te, które nadają się do prezentacji wyników. W takim przypadku druga metoda może być bardziej elastyczna i wygodna.
