Siedem trybów obserwacji mikroskopu
Mikroskopia w jasnym polu jest znaną metodą badania mikroskopowego, która jest szeroko stosowana w patologii, inspekcji i obserwacji wybarwionych skrawków. Wszystkie mikroskopy mogą pełnić tę funkcję.
2. Ciemne pole DF
Darkfield to właściwie oświetlenie ciemnego pola. Jego charakterystyka różni się od charakterystyki jasnego pola. Nie obserwuje bezpośrednio światła oświetlenia, ale obserwuje światło odbite lub ugięte przez badany obiekt. W związku z tym pole widzenia staje się ciemnym tłem, podczas gdy badany obiekt prezentuje jasny obraz.
Zasada ciemnego pola opiera się na zjawisku Tyndalla w optyce. Kiedy pył przechodzi bezpośrednio przez silne światło, ludzkie oko nie jest w stanie go zaobserwować, co jest spowodowane dyfrakcją silnego światła. Jeśli światło pada na nią ukośnie, w wyniku odbicia światła, cząsteczka wydaje się powiększać i jest widoczna dla ludzkiego oka.
Specjalnym akcesorium wymaganym do obserwacji w ciemnym polu jest kondensor ciemnego pola. Charakteryzuje się tym, że nie przepuszcza wiązki światła przez obiekt od dołu do góry, ale zmienia drogę światła tak, że pada ono ukośnie w kierunku obiektu, dzięki czemu światło oświetlające nie wpada bezpośrednio do soczewki obiektywu, i wykorzystuje odbicie lub dyfrakcję światła utworzonego przez powierzchnię obiektu Jasny obraz. Rozdzielczość obserwacji w ciemnym polu jest znacznie wyższa niż w przypadku obserwacji w jasnym polu, aż do {{0}},02—0,004
3.Kontrast fazowy PH
Podczas rozwoju mikroskopów optycznych pomyślne wynalezienie mikroskopii z kontrastem fazowym jest ważnym osiągnięciem nowoczesnej technologii mikroskopii. Wiemy, że ludzkie oko rozróżnia tylko długość fali (kolor) i amplitudę (jasność) fal świetlnych. W przypadku bezbarwnych i przezroczystych próbek biologicznych, gdy światło przechodzi, długość fali i amplituda zmieniają się nieznacznie i trudno jest obserwować próbkę w obserwacji w jasnym polu. .
Mikroskop z kontrastem fazowym wykorzystuje różnicę drogi optycznej badanego obiektu, to znaczy skutecznie wykorzystuje zjawisko interferencji światła do zmiany różnicy faz, której ludzkie oko nie może rozróżnić, na rozpoznawalną różnicę amplitudy, nawet w przypadku bezbarwnych i przezroczystych Substancje. stać się wyraźnie widocznym. To znacznie ułatwia obserwację żywych komórek, dlatego mikroskopia z kontrastem fazowym jest szeroko stosowana w mikroskopach odwróconych.
Podstawową zasadą działania mikroskopu z kontrastem fazowym jest zmiana różnicy dróg optycznych światła widzialnego przechodzącego przez preparat na różnicę amplitudy, poprawiając w ten sposób kontrast między różnymi strukturami i czyniąc różne struktury wyraźnie widocznymi. Światło po przejściu przez próbkę ulega załamaniu, odchyla się od pierwotnego toru optycznego i jest jednocześnie opóźniane o 1/4λ (długość fali). Jeśli zostanie zwiększona lub zmniejszona o 1/4λ, różnica dróg optycznych wyniesie 1/2λ, a dwie wiązki interferują po osi optycznej. Wzmocnij, zwiększ lub zmniejsz amplitudę, popraw kontrast. Pod względem budowy mikroskopy z kontrastem fazowym mają dwie szczególne cechy różniące się od zwykłych mikroskopów optycznych:
1. Pierścieniowa przysłona znajduje się pomiędzy źródłem światła a kondensorem, a jej zadaniem jest spowodowanie, aby światło przechodzące przez kondensor tworzyło pusty stożek świetlny i skupiało je na preparacie.
2. Pierścieniowa płytka fazowa Do soczewki obiektywu dodano płytkę fazową pokrytą fluorkiem magnezu, która może opóźnić fazę światła bezpośredniego lub światła ugiętego o 1/4λ. Podzielony na dwa rodzaje:
Płytka fazowa: opóźnij światło bezpośrednie o 1/4λ, dodaj fale świetlne po połączeniu dwóch grup fal świetlnych i zwiększ amplitudę, struktura próbki jest jaśniejsza niż otaczające medium, tworząc jasny kontrast (lub kontrast ujemny) .
Płytka fazy B: opóźnienie ugiętego światła o 1/4λ, fale świetlne dwóch grup światła są odejmowane po wyrównaniu osi, a amplituda staje się mniejsza, tworząc ciemny kontrast (lub kontrast dodatni), a struktura jest ciemniejszy niż otaczające medium
cztery. Różnicowy kontrast interferencyjny DIC
Różnicowa mikroskopia interferencyjna pojawiła się w latach 60. Może nie tylko obserwować bezbarwne i przezroczyste obiekty, ale także wykazywać trójwymiarowe poczucie ulgi i ma pewne zalety, których nie może osiągnąć mikroskopia z kontrastem fazowym. Efekt obserwacji jest jeszcze lepszy. jak żywy.
zasada;
Interferencja różnicowa zwana mikroskopią polega na użyciu specjalnego pryzmatu Wollastona do rozdzielania wiązki światła. Kierunki drgań rozdzielonych wiązek są prostopadłe do siebie, a intensywność jest równa, a wiązki przechodzą przez obiekt w dwóch punktach, które są bardzo blisko siebie i występuje niewielka różnica faz. Ponieważ odległość podziału między dwiema wiązkami światła jest bardzo mała, nie występuje zjawisko podwójnego obrazu, dzięki czemu obraz przedstawia trójwymiarowe, trójwymiarowe wrażenie.
