Parametry techniczne i umiejętności obsługi mikroskopu fluorescencyjnego
Parametry techniczne mikroskopu fluorescencyjnego 1. Okular szerokokątny 2. Achromatyczny obiektyw 3. Czterootworowy konwerter obiektywów 4. Urządzenie do fluorescencji opadającej Układ wzbudzenia niebieskiego (B) zielonego (G) 10lampa rtęciowa 0W 5. Współosiowy zgrubny mechanizm mikroogniskowania: zakres ogniskowania 15mm wartość mikrosiatki 0.002mm 6. Dwuwarstwowy mechaniczny stół warsztatowy zakres ruchu wzdłużnego: 70mm zakres ruchu bocznego: 50mm
Parametry techniczne mikroskopu fluorescencyjnego
1. Okular szerokokątny
2. Achromatyczny obiektyw
3. Konwerter obiektywu z czterema otworami
4. Urządzenie do fluorescencji opadającej Niebieski (B) Zielony (G) Układ wzbudzenia Lampa rtęciowa 100 W
Współosiowy mechanizm mikroogniskowania zgrubnego: zakres ogniskowania: 15 mm, wartość mikrosiatki: 0,002 mm
6. Dwuwarstwowy mechaniczny stół warsztatowy
Zakres ruchu wzdłużnego: 70 mm Zakres ruchu bocznego: 50 mm
Wskazówki i metody korzystania z mikroskopii fluorescencyjnej
（1） Slajd
Grubość slajdu powinna wynosić od 0,8 do 1,2 mm. Jeśli szkiełko jest zbyt grube, z jednej strony pochłania zbyt dużo światła, az drugiej strony nie może powodować gromadzenia się światła wzbudzającego na preparacie. Szkiełko musi być gładkie i czyste, o jednolitej grubości i bez znaczącej spontanicznej fluorescencji. Czasami potrzebne są szkiełka kwarcowe.
(2) Szklana osłona
Grubość szkiełka nakrywkowego wynosi około 0,17 mm i jest gładkie i czyste. W celu wzmocnienia wzbudzenia można również zastosować szkło nakrywkowe interferencyjne. Jest to specjalne szkło nakrywkowe pokryte kilkoma warstwami substancji (takich jak fluorek magnezu), które mają różne efekty interferencyjne dla różnych długości fal światła. Może pozwolić na płynne przejście fluorescencji, jednocześnie odbijając wzbudzenie, które może wzbudzić próbkę.
（3） Próbka
Skrawki tkankowe lub inne próbki nie powinny być zbyt grube. Na przykład, jeśli są zbyt grube, większość światła wzbudzenia jest zużywana w dolnej części preparatu, podczas gdy górna część obserwowana bezpośrednio przez obiektyw nie jest wystarczająco wzbudzana. Ponadto nakładanie się komórek lub maskowanie zanieczyszczeń może wpływać na ocenę.
（4） Środek mocujący
Gliceryna jest powszechnie stosowana jako środek montażowy i musi być wolna od spontanicznej fluorescencji, bezbarwna i przezroczysta. Jasność fluorescencji jest jaśniejsza przy pH 8,5 do 9,5 i nie jest łatwo szybko zanikać. Dlatego jako środek utrwalający powszechnie stosuje się równoważną mieszaninę glicerolu i 0,5 mol/l buforu węglanowego o pH od 9,{7}} do 9,5.
(5) Olej lustrzany
Ogólnie rzecz biorąc, podczas używania mikroskopu fluorescencyjnego ciemnego pola i mikroskopu olejowego do obserwacji preparatów konieczne jest stosowanie olejku do soczewek. Najlepiej stosować specjalny niefluorescencyjny olejek do soczewek, który można również zastąpić wspomnianym wcześniej glicerolem. Można również użyć ciekłej parafiny, ale współczynnik załamania światła jest niski, co ma niewielki wpływ na jakość obrazu.
