Prawidłowe stosowanie odwróconej mikroskopii fluorescencyjnej
Odwrócony mikroskop fluorescencyjny to wielofunkcyjny mikroskop stosowany w dziedzinie zaawansowanych badań biologicznych. Jego struktura jest złożona i kosztowna. Dlatego też, aby absolwenci medycyny mogli prawidłowo opanować zasady działania i użytkowania odwróconego mikroskopu fluorescencyjnego, nauczyciele muszą najpierw przekazać podstawową wiedzę na temat odwróconego mikroskopu fluorescencyjnego, zanim zademonstrują faktyczne działanie odwróconego mikroskopu fluorescencyjnego. Powinni przedstawić strukturę, zasadę, funkcję i podstawowe metody użycia odwróconego mikroskopu fluorescencyjnego, a następnie zademonstrować różne funkcje dla różnych próbek w określonych operacjach użytkowych, stopniowo ujednolicając działanie i użytkowanie odwróconego mikroskopu fluorescencyjnego dla absolwentów medycyny.
1. Prawidłowe wykorzystanie obserwacji wzrokowej. Jedną z funkcji odwróconego mikroskopu fluorescencyjnego jest obserwacja w jasnym polu widzenia. Jego podstawową zasadą jest uzyskanie obrazowania na jasnym tle w oparciu o różną absorpcję światła przez każdą część preparatu po oświetleniu światłem. Nadaje się głównie do obserwacji wybarwionych lub zabarwionych komórek, wycinków tkanek i innych próbek.
2. Poprawne wykorzystanie obserwacji różnicowej. Drugą funkcją odwróconego mikroskopu fluorescencyjnego jest obserwacja różnicy faz. Jego podstawową zasadą jest przekształcenie różnicy ścieżek optycznych różnych części próbki na różnicę amplitud i obserwowanie przez obiektyw różnicy faz z płytką fazową i reflektorem z okrągłą aperturą. Nadaje się głównie do obserwacji żywych komórek lub niezabarwionych skrawków tkanek. W procesie nauczania eksperymentalnego, oprócz prawidłowego poinstruowania studentów medycyny, jak postępować zgodnie z podstawowymi metodami obserwacji różnicy faz, ważniejsze jest poprowadzenie ich, aby zrozumieli i opanowali próbki za pomocą obserwacji różnicy faz. Dla nich najczęściej stosowaną metodą w przyszłych badaniach naukowych jest obserwacja mikroskopowa hodowanych komórek. Po pierwsze, przy doborze wyposażenia komórek ogólnie zaleca się stosowanie naczyń hodowlanych, płytek i butelek wykonanych ze szkła i tworzyw sztucznych. Są przeważnie bezbarwne i przezroczyste i można je bezpośrednio obserwować pod odwróconym mikroskopem fluorescencyjnym, bez konieczności wylewania płynu komórkowego lub poddawania się innym zabiegom. Po drugie, podczas obserwacji mikroskopowych nie należy od niechcenia otwierać pokrywy sprzętu, aby uniknąć zanieczyszczenia komórek. Wreszcie, w przypadku operatorów należy nosić rękawiczki, maski i białe fartuchy, aby nie tylko chronić własne zdrowie, ale także zapobiegać zanieczyszczeniu komórek.
3. Prawidłowe wykorzystanie obserwacji fluorescencyjnej. Trzecią funkcją odwróconego mikroskopu fluorescencyjnego jest obserwacja fluorescencji. Jego podstawową zasadą jest wykorzystanie światła wzbudzającego do wzbudzenia próbki w celu wytworzenia fluorescencji, uzyskując w ten sposób obserwację kształtu i położenia próbki. Nadaje się głównie do obserwacji próbek znakowanych fluorescencyjnie. Obserwacja fluorescencji jest ważną funkcją odwróconej mikroskopii fluorescencyjnej, wymagającej drogich akcesoriów i specjalnego zastosowania. Aby absolwenci medycyny mogli prawidłowo opanować zasady działania obserwacji fluorescencji, nauczyciele nie tylko uczą ich podstawowych metod działania, ale co ważniejsze, uczą ich wyjątkowości. Po pierwsze, podczas przygotowywania próbki powierzchnia szkiełka i szkiełka nakrywkowego powinna być gładka, a grubość powinna być odpowiednia (szkielet powinien mieć grubość od 0.8 mm do 1.2 mm, a szkiełko nakrywkowe powinno mieć grubość około {{5 }}.17mm); Próbka powinna mieć odpowiednią grubość, unikając nakładania się komórek lub maskowania zanieczyszczeń; Jako środek uszczelniający należy stosować równą mieszaninę gliceryny i buforu węglanowego (0,5mol/L pH 9,0-9,5). Po drugie, przed obserwacją fluorescencji należy wyłączyć światła w pomieszczeniu i białe światło odwróconego mikroskopu fluorescencyjnego, aby upewnić się, że znajdują się w ciemnym pomieszczeniu. Wreszcie, podczas obserwacji fluorescencji należy ściśle kontrolować czas obserwacji, zazwyczaj 1-2 godzin na raz, w przeciwnym razie fluorescencja zaniknie i zaniknie; Podczas regulacji źródła światła należy nosić okulary ochronne, aby uniknąć uszkodzenia okularów przez promieniowanie UV.
4. Prawidłowe wykorzystanie przechwytywania obrazu. W badaniach naukowych wymagane jest nie tylko, aby odwrócona mikroskopia fluorescencyjna umożliwiała wiele obserwacji, ale także, aby odwrócona mikroskopia fluorescencyjna umożliwiała przechwytywanie obrazu. System odwróconego mikroskopu fluorescencyjnego łączy mikroskop optyczny z komputerem poprzez konwersję fotoelektryczną, umożliwiając nie tylko obserwację mikroskopową w okularze, ale także dynamiczną obserwację obrazu w czasie rzeczywistym, edycję i przechowywanie na komputerze.
