Różnica między zwykłą mikroskopią optyczną a mikroskopią fluorescencyjną
Mikroskop optyczny: Jest to instrument optyczny wykorzystujący zasady optyczne do powiększania i obrazowania małych obiektów, których ludzkie oko nie może rozróżnić, w celu wydobycia dla ludzi informacji mikrostrukturalnych.
Mikroskop fluorescencyjny: Mikroskop fluorescencyjny wykorzystuje światło ultrafioletowe jako źródło światła do oświetlania badanego obiektu, powodując emisję fluorescencji, a następnie obserwuje kształt i położenie obiektu pod mikroskopem. Mikroskopia fluorescencyjna służy do badania absorpcji, transportu, dystrybucji i lokalizacji substancji wewnątrzkomórkowych. Niektóre substancje w komórkach, takie jak chlorofil, mogą emitować fluorescencję po wystawieniu na działanie promieniowania ultrafioletowego; Chociaż niektóre substancje same w sobie nie mogą emitować fluorescencji, mogą one również emitować fluorescencję po zabarwieniu barwnikami fluorescencyjnymi lub przeciwciałami fluorescencyjnymi i napromieniowaniu światłem ultrafioletowym. Mikroskopia fluorescencyjna jest jednym z narzędzi badań jakościowych i ilościowych tych substancji.
Mikroskop optyczny składa się zazwyczaj ze stolika, systemu oświetlenia punktowego, obiektywu, okularu i mechanizmu ogniskującego. System oświetlenia punktowego może uzyskać różne metody obserwacji, takie jak ciemne punkty na jasnym tle (tzw. oświetlenie jasnego pola) lub jasne punkty na ciemnym tle (tzw. oświetlenie ciemnego pola) poprzez zmianę metody oświetlenia, aby lepiej odkrywać i obserwować drobne struktury w różnych sytuacjach.
Mikroskopia fluorescencyjna i zwykła mikroskopia mają następujące różnice:
1. Metoda oświetlenia to zazwyczaj metoda kroplowa, w której źródło światła jest rzutowane na próbkę przez soczewkę obiektywu;
2. Źródłem światła jest światło ultrafioletowe o krótszej długości fali i wyższej rozdzielczości niż zwykłe mikroskopy;
3. Istnieją dwa specjalne filtry, ten znajdujący się przed źródłem światła służy do odfiltrowywania światła widzialnego, a ten pomiędzy okularem a soczewką obiektywu służy do odfiltrowywania światła ultrafioletowego w celu ochrony ludzkiego oka.
Mikroskopia fluorescencyjna jest również rodzajem mikroskopu optycznego, a główną różnicą są różne długości fal wzbudzenia między nimi. Określa to różnice w budowie i zastosowaniu mikroskopów fluorescencyjnych i zwykłych mikroskopów optycznych.
Mikroskopia fluorescencyjna jest podstawowym narzędziem cytochemii immunofluorescencyjnej. Składa się z głównych elementów, takich jak źródło światła, układ płytek filtrujących i układ optyczny. Polega na użyciu światła o określonej długości fali w celu pobudzenia próbki i wyemitowania fluorescencji, która jest powiększana przez system obiektywu i okularu w celu obserwacji obrazu fluorescencyjnego próbki.
