Trzy rodzaje obserwacji mikroskopowych
I. Jasne pole BF (Jasne pole BF)
BF jasnego pola to znana metoda mikroskopii, szeroko stosowana w patologii i testach do obserwacji zabarwionych skrawków, a wszystkie mikroskopy są w stanie wykonywać tę funkcję.
Jasne pole
II. Ciemne pole DF (Ciemne pole DF)
Ciemne pole DF to tak naprawdę oświetlenie ciemnego pola. Różni się od jasnego pola tym, że nie obserwuje bezpośrednio oświetlonego światła, ale światło odbite lub ugięte od badanego obiektu. W rezultacie pole widzenia staje się ciemnym tłem, a badany obiekt jawi się jako jasny obraz.
Zasada ciemnego pola widzenia opiera się na zjawisku Tyndalla w optyce, pył w przypadku silnego światła przez światło bezpośrednie, ludzkiego oka nie można zaobserwować, dzieje się tak z powodu silnego światła wokół przyczyny. Jeśli światło jest skierowane na niego ukośnie, cząsteczki wydają się zwiększać rozmiar w wyniku odbicia światła i stają się widoczne dla ludzkiego oka.
Specjalnym akcesorium wymaganym do obserwacji w ciemnym polu jest luneta ciemnego pola. Charakteryzuje się tym, że wiązka światła nie przechodzi przez badany obiekt od dołu do góry, lecz zmienia drogę światła tak, aby była skierowana ukośnie w stronę badanego obiektu, tak aby światło oświetlające nie przedostawało się bezpośrednio do wnętrza badanego obiektu. obiektywu, a jasny obraz powstaje dzięki wykorzystaniu odbitego lub ugiętego światła od powierzchni badanego obiektu. Rozdzielczość obserwacji w ciemnym polu jest znacznie wyższa niż obserwacji w jasnym polu, * aż do 0.02-0.004
Ciemne pole
III. Kontrast fazowy PH
W rozwoju mikroskopii optycznej pomyślne wynalezienie kontrastu fazowego PH jest ważnym osiągnięciem nowoczesnej technologii mikroskopii. Jak wiemy, oko ludzkie potrafi jedynie rozróżnić długość fali (kolor) i amplitudę (jasność) fal świetlnych, w przypadku bezbarwnych i jasnych próbek biologicznych, gdy światło przechodzi, długość fali i amplituda nie zmieniają się zbytnio i trudno jest do obserwacji preparatu w jasnym polu obserwacji.
Mikroskop z kontrastem fazowym do badań mikroskopowych wykorzystuje różnicę zakresu światła badanego obiektu, czyli skutecznie wykorzystuje zjawisko interferencji światła, aby zamienić nieodróżnialną różnicę fazową oka ludzkiego na zauważalną różnicę amplitud, a nawet bezbarwną i przezroczystą substancje mogą stać się wyraźnie widoczne. Znacznie ułatwia to obserwację żywych komórek, dlatego mikroskopia z kontrastem fazowym jest szeroko stosowana w mikroskopach odwróconych.
Podstawową zasadą mikroskopii z kontrastem fazowym jest to, że różnica w zakresie optycznym światła widzialnego przechodzącego przez próbkę zamienia się w różnicę amplitudy, zwiększając w ten sposób kontrast między różnymi strukturami i czyniąc je widocznymi. Światło jest załamywane przez próbkę i odchyla się od pierwotnej ścieżki światła, będąc jednocześnie opóźnionym o 1/4λ (długość fali). Jeśli 1/4λ zostanie ponownie zwiększone lub zmniejszone, różnica zakresu optycznego wyniesie 1/2λ, a interferencja między dwiema wiązkami fotosyntezy zostanie wzmocniona po zakłóceniu osi dwóch wiązek, a amplituda wzrośnie lub maleje, w ten sposób poprawiając kontrast. W strukturze mikroskop z kontrastem fazowym ma dwie specjalne cechy, które różnią się od zwykłego mikroskopu optycznego:
1. przesłona pierścieniowa (przesłona pierścieniowa) znajduje się pomiędzy źródłem światła a kondensatorem, jej rolą jest przepuszczanie światła przez kondensator w celu utworzenia pustego w środku stożka światła skupiającego się na próbce.
2. Płytka fazowa (pierścieniowa płytka fazowa) w soczewce obiektywu pokrytej fluorkiem magnezu Płytka fazowa, światło bezpośrednie lub odbite może być opóźnione w fazie o 1/4λ. Istnieją dwa rodzaje:
1. Płytka fazowa: światło bezpośrednie opóźnione o 1/4 λ, dwie grupy fal świetlnych, współosiowe dodanie fali świetlnej, wzrost amplitudy, struktura próbki niż otaczające medium jest jaśniejsza, powstawanie jasnego kontrastu (lub kontrastu ujemnego) .
2.Płytka fazowa B: światło ugięte jest opóźnione o 1/4 λ, dwie grupy fal świetlnych po połączeniu osi fali świetlnej zmniejszają się, amplituda maleje, powstawanie ciemnego kontrastu (lub kontrastu dodatniego ), struktura jest ciemniejsza niż otaczające medium.
