Mikroskop biofluorescencji pionowej
Zasada mikroskopii fluorescencyjnej jest użycie wysoce wydajnego źródła światła punktowego (takiego jak lampa rtęciowa ultra-wysokiego ciśnienia) w celu emisji pewnej długości fali światła (takiej jak światło ultrafioletowe 3650 λ lub fioletowe światło niebieskie 4200 λ) przez system filtra kolorowego jako światło wzbudzenia, które podnieca fluorescencyjne substancje w zakresie fluorescencji emitujących różne kolory. Następnie jest filtrowany przez blokujący (lub tłumiący) filtr za obiektywem obiektywnym i obserwuje się przez efekt powiększający okular.
Filtr blokujący ma dwie funkcje: po pierwsze, pochłania i blokuje światło wzbudzenia przed wejściem do okularu, aby uniknąć zakłócania fluorescencji i uszkadzania oczu; Drugim jest wybór i umożliwienie przejścia przez określoną fluorescencję, wykazując określony fluorescencyjny kolor.
Mikroskopy fluorescencyjne można podzielić na dwa typy na podstawie zasady ścieżki światła:
1. Mikroskop fluorescencyjny transmisyjny
Starsze mikroskopy fluorescencyjne wykorzystują światło reflektorów, aby wzbudzić fluorescencję, przekazując źródło światła wzbudzenia przez materiał próbki. Jego zaletą jest silna fluorescencja przy niskim powiększeniu, ale jej wadą jest to, że jej fluorescencja maleje wraz ze wzrostem powiększenia. Dlatego nadaje się tylko do obserwacji większych materiałów próbek.
2. Falling Light Fluorescence Microspope
Światło wzbudzenia spada z obiektywu obiektywnego na powierzchnię próbki, przy użyciu tego samego obiektywu obiektywnego co skraplacz oświetlenia i obiektyw obiektywu do zbierania fluorescencji.
Do ścieżki optycznej, która tworzy kąt 45 stopni z osi optycznej. Światło wzbudzenia jest odbijane w obiektywie obiektywnym i skupione na próbce. Fluorescencja generowana przez próbkę, a także światło wzbudzenia odbijane od powierzchni obiektywu obiektywnego i szkła osłony, wchodzą jednocześnie do obiektywu obiektywnego i powróć do rozdzielacza wiązki podwójnej kolorów, aby oddzielić światło wzbudzenia i fluorescencję. Resztkowe światło wzbudzenia jest następnie blokowane przez absorpcję filtra. Jeśli zastosowane są różne kombinacje filtrów wzbudzenia, podwójne separatory wiązki kolorów i filtry blokujące, mogą one zaspokoić potrzeby różnych produktów reakcji fluorescencyjnej.
Zaletą tego mikroskopu fluorescencyjnego są jednolite oświetlenie pola, wyraźne obrazowanie i silniejsza fluorescencja z większym powiększeniem.
