Jakie są wymagania dotyczące próbek do mikroskopii świetlnej?
W procesie przygotowania próbki w mikroskopie optycznym grubość wycinka próbki wynosi od 2 do 25 µm; grubość skrawka mikroskopu elektronowego mieści się w zakresie 50-100} nm (z wyjątkiem wysokonapięciowego mikroskopu elektronowego grubość próbki może osiągnąć 1 μm), więc zastosowana metoda krojenia nie jest taka sama.
Pod względem nośnika nośnikiem sekcji mikroskopu optycznego jest szkiełko, a nośnikiem sekcji mikroskopu elektronowego jest siatka nośna.
Jeśli chodzi o fiksację, skrawki mikroskopu optycznego są mocowane za pomocą złożonego utrwalacza, podczas gdy skrawki mikroskopu elektronowego są wielokrotnie mocowane za pomocą pojedynczego utrwalacza
Pod względem barwienia barwienie próbek optycznych jest stosunkowo proste. W zależności od różnych próbek obserwacyjnych i rodzaju mikroskopu optycznego zwykle wystarczy użyć kilku utrwalonych plam. Istnieje wiele metod ponownego barwienia próbek z mikroskopu elektronowego i są one również bardzo skomplikowane, takie jak barwienie negatywne, barwienie srebrem i tak dalej.
Jeśli chodzi o zatapianie, jako środki do zatapiania skrawków mikroskopów optycznych stosuje się parafinę, kolodium, żelatynę itp.; żywica epoksydowa, żywica polistyrenowa, żywica izobutylenowa i żywica rozpuszczalna w wodzie są stosowane jako środki do zatapiania skrawków mikroskopu elektronowego.
Aby pole widzenia mikroskopu otrzymało równomierne i wystarczające oświetlenie, konieczne jest wyregulowanie układu ścieżki optycznej oświetlenia podczas pierwszej instalacji i debugowania mikroskopu. wymagania. Ponadto prawidłowe uchwycenie regulacji układu toru optycznego oświetlenia jest niezbędnym krokiem po wymianie żarówki w procesie użytkowania mikroskopu, a także niezbędnym środkiem do okresowego sprawdzenia działania mikroskopu w proces codziennego użytkowania. Regulacja układu toru optycznego oświetlenia mikroskopu obejmuje głównie następujące 4 pozycje: 1. Wstępna regulacja komory lampy źródła światła na zewnątrz mikroskopu ① Najpierw otwórz obudowę komory lampy i włóż żarówkę halogenową do oprawki naciskając klip wiosenny. Brud, taki jak odciski palców pozostawione na żarówce, wpłynie na jej żywotność. ②Połóż lampę na stole, po włączeniu zasilania specjalnym śrubokrętem wyreguluj otwór pokrętła ogniskowania lampy (oznaczony „←→”), tak aby żarnik rzucał się na ścianę 1-2 m, a obraz filamentu zostanie wyregulowany. Następnie wyreguluj wysokość lampy, aby wyregulować otwór żarnika (oznaczony „──”), aby zapewnić odpowiednią pozycję żarnika; następnie wyreguluj lewe i prawe otwory na śruby regulacji położenia lampy (oznaczone „──”), aby ustawić odpowiednią lewą i prawą pozycję żarnika.
2. Kontrola i korekcja położenia oświetlacza źródła światła (żarnika) w mikroskopie ma na celu dopasowanie końca obrazu oświetlacza do pola widzenia obiektywu oraz zapewnienie, że pole widzenia mikroskopu jest w pełni i równomiernie odbierana z perspektywy źródła światła. Oświetlenie, które jest warunkiem wstępnym dostosowania systemu oświetleniowego Kühler. Wymagane podstawowe narzędzia: Teleskopy centrujące są wyposażone w zakup mikroskopu. ① Odłącz tuleję z matowego szkła w lampie i umieść lampę z powrotem na mikroskopie ② Wybierz soczewkę obiektywu 10×, włącz program źródła światła, aby znaleźć próbkę i wyraźnie ustaw ostrość, a następnie użyj obiektywu 40× soczewka do wyraźnego ogniskowania próbki (obiektyw 40× Wyraźnie widać cały obraz włókna); ③ Otwórz maksymalnie przysłonę aperturową i przesłonę polową kondensora; ④ Odłącz jeden z okularów, zastąp go lunetą centrującą, chwyć białą część i drugą ręką wysuń czarny okular. W polu widzenia widoczny jest obraz włókna; ⑤Jeśli pozycja żarnika nie jest odpowiednia, wyreguluj otwór „──”, wyreguluj obraz żarnika w kierunku poziomym, wyreguluj otwór „──” i wyreguluj obraz żarnika w kierunku pionowym, aż dostosuj obraz żarnika do okrągłego obraz, który po prostu wypełnia aperturę obiektywu; ⑥ Po regulacji włóż tuleję z matowego szkła z powrotem do pierwotnej pozycji, odłącz teleskop centrujący i wymień okular do następnej regulacji. Wyżej wymienioną regulację oświetlenia źródła światła w pomieszczeniu na zewnątrz mikroskopu oraz kalibrację położenia oświetlacza źródła światła wewnątrz mikroskopu należy przeprowadzić tylko wtedy, gdy mikroskop jest instalowany i debugowany po raz pierwszy, a żarówka jest zastąpiony. W przypadku pomyłki możesz przywrócić go do pierwotnego stanu zgodnie z powyższymi krokami.
3. Prawidłowa regulacja układu oświetlenia Kohlera (Kohlera) Prawidłowa regulacja mikroskopu, jednym z głównych zadań jest regulacja układu ścieżki światła oświetlenia, a kluczowa regulacja układu oświetlenia Kohlera. Każdy, kto używa mikroskopów, zwłaszcza ten, który wykonuje mikrofotografię, powinien mieć pewne zrozumienie i opanowanie zasad działania systemu oświetlenia firmy Kühler oraz etapów jego regulacji, aby móc w pełni korzystać z funkcji mikroskopu. Powstałe zdjęcia mogą być bardziej spójne i doskonałe w efekcie. Zasada działania systemu oświetlenia firmy Kühler jest prosta: światło emitowane przez dowolny punkt oświetlacza źródła światła może oświetlać pole widzenia mikroskopu, a światło emitowane przez każdy punkt oświetlacza źródła światła jest zbierane i jest w pole widzenia mikroskopu. Osiąga się bardzo wystarczające i równomierne oświetlenie. Celem regulacji systemu oświetlenia firmy Kuhler jest uzyskanie równomiernego i wystarczającego oświetlenia dla obserwowanego pola widzenia oraz zapobieganie wpływowi światła rozproszonego lub zakłócaniu systemu obrazowania, aby uniknąć tworzenia się mgły na negatywie podczas fotografowania. Niezbędne komponenty wysokoregulowanego systemu oświetlenia Kühler: przesłona polowa, system kondensora z regulacją w osi. ① Wybierz obiektyw 10× i okular 10× ② Umieść przednią soczewkę kondensora na torze optycznym, ustaw przysłonę apertury w umiarkowanym położeniu (nie za duży lub nie za mały), następnie podnieś kondensor do górnej pozycji i ustaw obrotowy talerz kondensora w pozycji „J” jasnego pola ③ Ustaw przysłonę polową na minimum (0,1)
④ Umieść zapieczętowaną próbkę biologiczną na scenie, włącz źródło światła i wyraźnie ustaw ostrość
⑤ W polu widzenia pojawi się lokalnie oświetlony obszar lub jasny punkt, który jest zamazanym obrazem przesłony polowej, na którym wyraźnie widać szczegóły próbki; Zobacz wyraźnie szczegóły próbki
⑥ Obniż nieco kondensor, aby jasny punkt w polu widzenia stopniowo się zwężał i stopniowo stawał się wyraźnym wielokątnym obrazem, który jest wyraźnym obrazem przysłony polowej;
⑦ W normalnych warunkach wielokątny obraz nie znajduje się na środku pola widzenia. Konieczne jest wyregulowanie pary śrub centrujących kondensora, aby ustawić wielokątny obraz pola widzenia w pozycji środkowej;
⑧ Stopniowo otwieraj przysłonę pola widzenia, aby wielokątny obraz stał się wpisanym wielokątem pola widzenia, a następnie sprawdź stan wyrównania. Jeśli wyrównanie nie jest idealne, kontynuuj nieznaczną regulację śruby wyrównującej;
⑨ Lekko otwórz przysłonę polową, aby wielokątny obraz zniknął na krawędzi pola widzenia. W tym momencie regulacja systemu oświetlenia firmy Kühler jest zakończona. Po wyregulowaniu systemu oświetlenia Kühlera całe pole widzenia zostało oświetlone równomiernie, a mikrofotografie były jasne i wyraźne z normalnym kontrastem.
