Dlaczego powiększenie soczewki olejowej jest większe niż w przypadku zwykłego obiektywu?
Powody, dla których należy utrwalić bakterie przed barwieniem w eksperymentach mikrobiologicznych:
1: Zabij komórki i uczyń barwnik łatwym do pokolorowania.
Po drugie: Spraw, aby bakterie przylegały do szkiełka i nie były łatwo zmywane przez wodę.
Podczas mocowania suszyć powoli. Jeśli bardzo chcesz przyspieszyć proces, możesz go kilka razy wysuszyć w odległości nad płomieniem lampki alkoholowej. Nie susz szkła, aby się nagrzało, w przeciwnym razie może to spowodować zniszczenie bakterii.
Barwienie metodą Grama i obserwacja mikroskopowa bakterii
Zasada eksperymentalna
Zasada barwienia metodą Grama: Różne reakcje bakterii na barwienie metodą Grama wynikają z odmiennego składu i struktury ich ścian komórkowych. Ściana komórkowa bakterii Gram-dodatnich składa się głównie z sieci peptydoglikanów. Po potraktowaniu etanolem wielkość porów struktury sieciowej zmniejsza się w wyniku odwodnienia, a przepuszczalność maleje, powodując w ten sposób utworzenie kompleksu fioletu krystalicznego-jodu. Substancja nie jest łatwo eluowana i pozostaje w komórkach. Po odbarwieniu i bejcowaniu kontrastowym zachowuje się niebiesko-fioletowy kolor barwnika podstawowego. Warstwa peptydoglikanu ściany komórkowej bakterii Gram-ujemnych jest cienka i zawiera dużą zawartość lipidów. Dlatego podczas odbarwiania lipidy rozpuszczają się w etanolu (lub acetonie), a przepuszczalność ściany komórkowej wzrasta, dzięki czemu kompleks fioletu krystalicznego-jodu jest stosunkowo łatwy do wyeluowania. Po wybarwieniu kontrastowym komórki barwi się czerwonym kolorem barwnika kontrastowego. Zasada obrazowania mikroskopowego: Współczesne zwykłe mikroskopy optyczne wykorzystują dwa systemy soczewek, okulary i soczewki obiektywowe, do powiększania obrazów, dlatego często nazywane są mikroskopami złożonymi. W układzie optycznym mikroskopu najważniejsze jest działanie obiektywu. Soczewka olejowa ma największe powiększenie i jest najważniejsza w badaniach mikrobiologicznych. Głównym celem dodania kropli oleju do soczewek pomiędzy szkiełko a soczewkę jest zwiększenie jasności oświetlenia i zwiększenie rozdzielczości mikroskopu. Użycie oleju zamiast powietrza jako ośrodka propagacji światła zmniejsza załamanie lub całkowite odbicie światła, dzięki czemu obserwowany obraz jest wyraźniejszy.
Poszukaj kolonii bakterii, które chcesz obserwować pod mikroskopem o małym powiększeniu (kontynuuj przesuwanie szkiełka, jeśli poczujesz czerwony cień, natychmiast zatrzymaj się, dostosuj powiększenie, jeśli nie jest to kolonia, patrz dalej), podnieś tubus obiektywu , a następnie przełącz na soczewkę olejową. Dodaj kroplę olejku cedrowego do obszaru próbki i za pomocą regulatora zgrubnego ostrożnie opuść tubus soczewki, tak aby soczewka olejowa była zanurzona w oleju do soczewek i prawie stykała się z preparatem. Podnieś kondensor do najwyższej pozycji i otwórz aperturę. Użyj pokrętła zgrubnego, aby powoli unieść tubus obiektywu, aż obraz obiektu pojawi się w polu widzenia, a pokrętła dokładnego, aby był wyraźny i ostry.
