Wymagania dotyczące przygotowania próbek pod mikroskopem fluorescencyjnym
(i) Slajdy
Grubość szkiełka powinna wynosić od 0,8 do 1,2 mm, zbyt grube zbocza z jednej strony, większa absorpcja światła, z drugiej strony nie mogą spowodować wzbudzenia światła w zebranej próbce. Szkiełko musi być gładkie, mieć jednakową grubość, bez widocznej autofluorescencji. Czasami trzeba użyć szkiełka kwarcowego.
(ii) szkiełko nakrywkowe
Szkiełka nakrywkowe mają około 0,17 mm grubości i są gładkie. W celu wzmocnienia wzbudzenia światła, można go również zastosować do interferencji ze szkiełkiem nakrywkowym, jest to specjalna powierzchnia pokryta szeregiem warstw o różnej długości fali światła, które odgrywa inną rolę w interferencji substancji (takich jak fluorek magnezu) szkiełko nakrywkowe, które może sprawić, że fluorescencja będzie gładka i odbije wzbudzenie światła, odbicie wzbudzenia światła żeńskiego może wzbudzić próbkę.
(C) próbki
Skrawki tkanek lub inne próbki nie mogą być zbyt grube, np. zbyt gęste światło wzbudzenia jest pochłaniane głównie w dolnej części próbki, a soczewka obiektywu bezpośrednio obserwowana w górnej części przy niewystarczającym wzbudzeniu. Ponadto nakładanie się komórek lub maskowanie zanieczyszczeń wpływa na ocenę.
(D) środek uszczelniający
Powszechnie stosowany środek uszczelniający glicerol, nie może być autofluorescencją, bezbarwny i przezroczysty, jasność fluorescencji w pH 8,5 ~ 9,5, gdy jest jaśniejsza, niełatwa do szybkiego zaniku. Dlatego powszechnie stosuje się glicerynę i 0,5 mol/l pH 9,0 ~ 9,5 buforu węglanowego w równej ilości mieszaniny jako uszczelniacz.
(E) olej lustrzany
Ogólna obserwacja próbek za pomocą mikroskopu fluorescencyjnego w ciemnym polu i zwierciadła olejowego, należy stosować olej lustrzany, * dobrze stosować specjalny niefluorescencyjny olej lustrzany, można również stosować zamiast powyższej gliceryny, można również stosować ciekłą parafinę, ale współczynnik załamania światła jest niższy , jakość obrazu ulega nieznacznemu pogorszeniu.
