Różnica między zwykłym mikroskopem świetlnym a mikroskopem fluorescencyjnym
Mikroskop optyczny: Jest to instrument optyczny wykorzystujący zasady optyczne do powiększania i obrazowania małych obiektów, których ludzkie oko nie może rozróżnić, dzięki czemu ludzie mogą wyodrębnić informacje o mikrostrukturze.
Mikroskop fluorescencyjny: Mikroskop fluorescencyjny wykorzystuje światło ultrafioletowe jako źródło światła do napromieniania badanego obiektu, aby emitował fluorescencję, a następnie obserwuje kształt i położenie obiektu pod mikroskopem. Mikroskopia fluorescencyjna służy do badania absorpcji i transportu substancji w komórkach, dystrybucji i lokalizacji substancji chemicznych itp. Niektóre substancje w komórkach, takie jak chlorofil, mogą fluoryzować po napromieniowaniu promieniami ultrafioletowymi; chociaż niektóre substancje same w sobie nie mogą fluorescować, mogą również fluorescować po zabarwieniu barwnikami fluorescencyjnymi lub przeciwciałami fluorescencyjnymi po napromieniowaniu promieniami ultrafioletowymi. Mikroskopia fluorescencyjna jest jednym z narzędzi do badań jakościowych i ilościowych tego typu substancji.
Mikroskop optyczny składa się zazwyczaj ze stolika, systemu oświetlenia punktowego, soczewki obiektywu, okularu i mechanizmu ogniskującego. Zmieniając metodę oświetlenia, system oświetlenia punktowego może uzyskać różne metody obserwacji, takie jak punkty ciemnych obiektów na jasnym tle (tzw. oświetlenie jasnego pola) lub jasne punkty obiektów na ciemnym tle (tzw. oświetlenie ciemnego pola), aby lepiej odkryć i obserwować mikrostruktury w różnych sytuacjach.
Mikroskopy fluorescencyjne różnią się od zwykłych mikroskopów następującymi cechami:
1. Metoda oświetlenia jest zwykle episkopowa, to znaczy źródło światła jest rzutowane na próbkę przez soczewkę obiektywu;
2. Źródłem światła jest światło ultrafioletowe, długość fali jest krótsza, a rozdzielczość jest wyższa niż w przypadku zwykłych mikroskopów;
3. Istnieją dwa specjalne filtry, ten znajdujący się przed źródłem światła służy do odfiltrowywania światła widzialnego, a ten pomiędzy okularem a soczewką obiektywu służy do odfiltrowywania promieni ultrafioletowych w celu ochrony ludzkich oczu.
Mikroskop fluorescencyjny jest również rodzajem mikroskopu optycznego, główna różnica polega na tym, że długość fali wzbudzenia obu jest inna. Określa to różnicę między mikroskopem fluorescencyjnym a zwykłym mikroskopem optycznym pod względem struktury i zastosowania.
Mikroskopia fluorescencyjna jest niezbędnym narzędziem w cytochemii immunofluorescencyjnej. Składa się z głównych elementów, takich jak źródło światła, układ płytek filtrujących i układ optyczny. Polega na użyciu światła o określonej długości fali w celu pobudzenia próbki do emisji fluorescencji oraz obserwacji obrazu fluorescencyjnego próbki poprzez wzmocnienie układu soczewki obiektywu i okularu.
