Jak wyregulować intensywność lasera w laserowym skaningowym mikroskopie konfokalnym
Istnieją dwa współczynniki regulacji intensywności lasera: pokrętło regulacji mocy i-przestrajalny filtr akustyczny (AOTF)
1. Pokrętło regulacji mocy: Zwykle ustawione na 30% wartości maksymalnej. Zwiększanie mocy wyjściowej skraca żywotność lasera i generuje szum lasera. Aby uzyskać najlepszą intensywność, należy najpierw dostosować parametry AOTF, PMT itp.
2. Przestrajalny filtr akustooptyczny: kontroluje wiązkę światła wzbudzenia i intensywność oraz może włączać i wyłączać laser lub regulować go w zakresie 0-100% w ciągu milisekund. Pozwala to na zastosowanie różnych wiązek laserowych dla każdego punktu obrazu i dobór wymaganego natężenia.
Zasada działania: Wykorzystuje efekt dyfrakcji Bragga fal dźwiękowych rozchodzących się w różnych ośrodkach na padającą dyfrakcję Bragga w ośrodku propagacji. Kiedy na wejściu znajduje się sygnał RF o określonej częstotliwości, AOTF załamuje padające światło polichromatyczne i wybiera światło monochromatyczne o długości fali wejściowej. Długość fali światła monochromatycznego odpowiada-do-częstotliwości RF f. Dopóki sygnał elektryczny jest dostrojony, długość fali wyjściowej można szybko i losowo zmieniać. AOTF umożliwia ciągłą regulację intensywności lasera i posiada funkcję szybkiej regulacji, realizując lokalną stymulację i skanowanie, szybkie przełączanie długości fali (na poziomie mikrosekund). W laserowej mikroskopii konfokalnej fotopowielacze nie mogą zwiększać intensywności lasera, ale mogą regulować intensywność światła po obrazowaniu. Dlatego regulując napięcie fotopowielacza, można regulować jasność obrazu. Ponadto rozmiar ogniskowej dziurki wpływa na ilość fotonów, a także może regulować jasność obrazu. Fotopowielacz to specjalna lampa próżniowa, która jest niezwykle wrażliwa na światło ultrafioletowe, widzialne i bliską-podczerwień. Może wzmocnić przychodzący słaby sygnał świetlny 108 razy, umożliwiając pomiar sygnału świetlnego.
