Kontrast interferencyjny mikroskopu różnicowego DIC
Różnicowa mikroskopia interferencyjna pojawiła się w latach 60-tych, może nie tylko obserwować bezbarwne i przezroczyste obiekty, a obraz przedstawia wspaniały relief trójwymiarowy, a mikroskopia z kontrastem fazowym nie może osiągnąć niektórych zalet, efekt obserwacji jest większy realistyczny.
Zasada.
Inspekcja różnicowo-interferencyjna polega na wykorzystaniu specjalnych pryzmatów Wollastona do rozbicia wiązki światła. Wydzielona z kierunku drgań wiązki prostopadłej do siebie i o jednakowej intensywności, wiązka znajdowała się w bliskiej odległości od dwóch punktów przechodzących przez badany obiekt, w fazie niewielkiej różnicy. Ze względu na odległość podziału dwóch wiązek jest bardzo mała i nie ma zjawiska zjawy, dzięki czemu obraz przedstawia wrażenie trójwymiarowości.
Obraz interferencji różnicowej
Zasada fizyczna mikroskopu DIC różni się całkowicie od mikroskopu z kontrastem fazowym, a konstrukcja techniczna jest znacznie bardziej złożona. DIC wykorzystuje światło spolaryzowane i ma cztery specjalne elementy optyczne: polaryzator, pryzmat DIC, suwak DIC i analizator. Polaryzator montowany jest bezpośrednio przed układem koncentratora i polaryzuje światło liniowo. W koncentratorze zainstalowany jest pryzmat Roymersa, tzw. pryzmat DIC, który rozbija wiązkę światła na dwie wiązki światła (x i y) o różnych kierunkach polaryzacji, obie pod niewielkim kątem. Kondensator ustawia dwie wiązki światła w kierunku równoległym do osi optycznej mikroskopu. * Początkowo dwie wiązki światła są w fazie, po przejściu przez sąsiedni obszar próbki, ze względu na grubość próbki i inny współczynnik załamania światła, spowodowały, że w obu wiązkach światła wystąpiła różnica zakresu optycznego. Na tylnej płaszczyźnie ogniskowej obiektywu zamontowany jest pierwszy pryzmat Royalsa, szybowiec DIC, który łączy dwie wiązki światła w jedną wiązkę.
W tym momencie płaszczyzny polaryzacji (x i y) dwóch wiązek pozostają. Na koniec wiązka przechodzi przez pierwsze urządzenie polaryzujące, czyli deflektor. Zanim wiązki uformują obraz DIC w okularze, detektor ustawia się pod kątem prostym do kierunku polaryzatora. Detektor zakłóca dwie prostopadłe fale świetlne, łącząc je w dwie wiązki światła o tej samej płaszczyźnie polaryzacji. Różnica zasięgu optycznego pomiędzy falami x i y określa ilość przepuszczanego światła. Gdy różnica zasięgu optycznego wynosi 0, przez detektor nie przechodzi żadne światło; gdy różnica zasięgu optycznego jest równa połowie długości fali, przechodzące światło osiąga wartość maksymalną. Zatem na szarym tle struktura próbki wygląda jak różnica światła i ciemności. W celu optymalizacji kontrastu obrazu różnicę zasięgu optycznego można zmienić regulując podłużne przycięcie suwaka DIC, który zmienia jasność obrazu. Regulacja suwaka DIC może sprawić, że drobna struktura preparatu pokaże pozytywny lub negatywny obraz projekcyjny, zwykle po jednej stronie światła, a po drugiej stronie ciemności, co tworzy sztuczny trójwymiarowy efekt próbki, podobny do płaskorzeźba na marmurze.
