Właściwe użytkowanie odwróconego mikroskopu fluorescencyjnego
Odwrócony mikroskop fluorescencyjny to wielofunkcyjny mikroskop stosowany w dziedzinie badań biologicznych wysokiej klasy. Jego struktura jest złożona i kosztowna. Dlatego, aby absolwenci medycyny prawidłowo zrozumieli działanie i użycie odwróconego mikroskopu fluorescencyjnego, nauczyciele muszą najpierw zademonstrować rzeczywiste działanie odwróconego mikroskopu fluorescencyjnego. Wcześniej zorganizowano kurs, który miał na celu poznanie podstawowej wiedzy o odwróconych mikroskopach fluorescencyjnych, zapoznanie z budową, zasadą, funkcją i podstawowymi metodami użytkowania odwróconych mikroskopów fluorescencyjnych, a następnie w specyficznym działaniu, dla różnych preparatów, zademonstrować różne funkcje, od płytkich do głębokich, stopniowo Aby ujednolicić użycie odwróconych mikroskopów fluorescencyjnych przez studentów medycyny.
1. Prawidłowe wykorzystanie obserwacji w jasnym polu. Jedną z funkcji odwróconego mikroskopu fluorescencyjnego jest obserwacja w jasnym polu. Podstawową zasadą jest to, że po napromieniowaniu próbki światłem absorpcja światła przez każdą część jest inna, aby uzyskać obrazowanie na jasnym tle. Nadaje się głównie do barwionych lub kolorowych komórek, Obserwacja próbek, takich jak skrawki tkanek.
2. Prawidłowe stosowanie obserwacji z kontrastem fazowym. Drugą funkcją odwróconego mikroskopu fluorescencyjnego jest obserwacja z kontrastem fazowym. Jego podstawową zasadą jest przekształcenie różnicy dróg optycznych różnych części próbki w różnicę amplitud. Obserwacja prowadzona jest przez obiektyw fazowo-kontrastowy z płytką fazową oraz soczewkę kondensorową z przysłoną pierścieniową. Ma zastosowanie głównie do obserwacji żywych komórek lub niebarwionych skrawków tkanek, w procesie nauczania eksperymentalnego, oprócz prawidłowego prowadzenia studentów medycyny w celu obserwacji podstawowych metod operacyjnych obserwacji kontrastu fazowego, ważniejsze jest poprowadzenie ich do zrozumieć i opanować próbki używane do obserwacji z kontrastem fazowym. Dla nich obserwacja mikroskopowa hodowanych komórek jest najczęściej wykorzystywana w przyszłych badaniach naukowych. Przede wszystkim przy doborze wyposażenia celi generalnie zaleca się stosowanie szklanych i plastikowych naczyń hodowlanych, płytek hodowlanych i butelek hodowlanych. Większość z nich jest bezbarwna i przezroczysta i można je obserwować bezpośrednio na odwróconym mikroskopie fluorescencyjnym bez wylewania płynu komórkowego i innych zabiegów. Po drugie, podczas obserwacji mikroskopowej nie otwieraj do woli pokrywy sprzętu, aby nie zanieczyścić komórek. Wreszcie, operatorzy muszą nosić rękawiczki, maski i białe fartuchy, które mogą nie tylko chronić ich własne zdrowie, ale także zapobiegać zanieczyszczeniu komórek.
3. Prawidłowe wykorzystanie obserwacji fluorescencji. Trzecią funkcją odwróconego mikroskopu fluorescencyjnego jest obserwacja fluorescencji. Podstawową zasadą jest wykorzystanie światła wzbudzenia do wzbudzenia próbki w celu wygenerowania fluorescencji, aby zrealizować obserwację kształtu i położenia próbki. Nadaje się głównie do obserwacji próbek znakowanych fluorescencyjnie. Obserwacja fluorescencji jest ważną funkcją odwróconego mikroskopu fluorescencyjnego, a jego akcesoria są drogie i specjalne w użyciu. Aby absolwenci medycyny prawidłowo zrozumieli działanie i wykorzystanie obserwacji fluorescencyjnej, nauczyciele powinni nie tylko nauczyć ich podstawowych metod działania, ale co ważniejsze, nauczyć ich opanowania jej specyfiki. Przede wszystkim w przygotowaniu preparatów szkiełko podstawowe i szkiełko nakrywkowe powinny mieć gładką powierzchnię i odpowiednią grubość (szkło na szkiełko powinno mieć grubość od 0},8 mm do 1,2 mm, a szkiełko nakrywkowe około { {5}},17 mm); próbka powinna mieć odpowiednią grubość i unikać nakładania się komórek lub maskowania przez zanieczyszczenia; podłoże do zamykania powinno zawierać równą objętość mieszaniny glicerolu i buforu węglanowego (0,5 mol/l pH9,0-9,5). Po drugie, przed obserwacją fluorescencyjną należy wyłączyć światło elektryczne w pomieszczeniu oraz białe światło odwróconego mikroskopu fluorescencyjnego, aby zapewnić warunki w ciemnym pomieszczeniu. Wreszcie, w przypadku obserwacji fluorescencji, czas obserwacji powinien być ściśle kontrolowany, zazwyczaj 1-2 godzin/czas jest odpowiedni, w przeciwnym razie fluorescencja osłabi się i zniknie; podczas regulacji źródła światła należy nosić okulary ochronne, aby uniknąć uszkodzenia okularów przez promienie ultrafioletowe.
4. Prawidłowe użycie przechwytywania obrazu. W badaniach naukowych wymagane jest nie tylko, aby odwrócony mikroskop fluorescencyjny mógł realizować różne obserwacje, ale także wymaga, aby odwrócony mikroskop fluorescencyjny mógł realizować przechwytywanie obrazu. System odwróconego mikroskopu fluorescencyjnego łączy mikroskop optyczny z komputerem poprzez konwersję fotoelektryczną, nie tylko do obserwacji mikroskopowych na okularze, ale także do dynamicznej obserwacji obrazu w czasie rzeczywistym, edycji i zapisywania na komputerze.
