Struktura i główne elementy mikroskopu fluorescencyjnego
(1) Źródło światła
Obecnie jako źródło światła powszechnie stosuje się ultra-wysokociśnieniową lampę rtęciową o mocy 200 W. Wykonany jest ze szkła kwarcowego i ma kulisty kształt pośrodku, wypełniony pewną ilością rtęci. Podczas pracy wyładowanie pomiędzy dwiema elektrodami powoduje odparowanie rtęci, a ciśnienie wewnątrz bańki gwałtownie wzrasta. Kiedy rtęć całkowicie wyparuje, może osiągnąć 50-70 standardowych ciśnień atmosferycznych, co zwykle zajmuje 5–15 minut. Luminescencja ultrawysokoprężnych lamp rtęciowych jest wynikiem wyładowania pomiędzy elektrodami, które w sposób ciągły dysocjuje i redukuje cząsteczki rtęci, emitując fotony światła. Emituje silne światło ultrafioletowe i niebieskofioletowe, wystarczające do wzbudzenia różnych substancji fluorescencyjnych, dlatego jest szeroko stosowany w mikroskopach fluorescencyjnych.
(2) System filtrów barwnych
System filtrów barwnych jest ważną częścią mikroskopu fluorescencyjnego i składa się z płytki filtra wzbudzającego i płytki filtra tłumiącego. Model płyty filtrującej i nazwy producentów są często niespójne. Nazwy płytek filtracyjnych na ogół pochodzą od podstawowych tonów kolorów, przy czym litery z przodu reprezentują odcienie kolorów, litery z tyłu reprezentują szkło, a liczby reprezentują charakterystykę modelu. Mikroskop Olimpu
(3) Obiektyw
Można stosować wszystkie rodzaje soczewek obiektywowych, ale soczewki achromatyczne nadają się do fluorescencji ze względu na ich wyjątkowo niską samofluorescencję i przepuszczalność światła (zakres długości fal). Ze względu na to, że jasność fluorescencyjna obrazu w polu mikroskopu jest wprost proporcjonalna do kwadratu apertury obiektywu i odwrotnie proporcjonalna do jej powiększenia, w celu poprawy jasności obrazów fluorescencyjnych należy stosować obiektyw o większym współczynniku apertury. Zwłaszcza przy dużym powiększeniu jego wpływ jest bardzo znaczący. Dlatego w przypadku próbek o niewystarczającej fluorescencji należy zastosować soczewkę obiektywu o wysokim współczynniku apertury w połączeniu z soczewką okularu o możliwie najniższej wartości (4 ×, 5 ×, 6,3 × itd.).
(4) Lustro odblaskowe
Warstwa odblaskowa lustra jest zwykle pokryta aluminium, ponieważ aluminium pochłania mniej światła ultrafioletowego i widzialnego w obszarze niebieskofioletowym, ze współczynnikiem odbicia ponad 90%, podczas gdy srebro odbija tylko 70%; Generalnie stosuje się lustra płaskie.
