Techniki obserwacji pod mikroskopem optycznym
Mikroskop optyczny to instrument optyczny, który wykorzystuje światło jako źródło światła do powiększania i obserwowania małych struktur niewidocznych gołym okiem. Pierwszy mikroskop został wykonany przez optyka w 1604 roku.
W ciągu ostatnich dwóch dekad naukowcy odkryli, że mikroskopy optyczne mogą być używane do wykrywania, śledzenia i obrazowania obiektów mniejszych niż połowa długości fali konwencjonalnego światła widzialnego lub kilkaset nanometrów.
Ponieważ mikroskopy świetlne nie były tradycyjnie używane do badania w nanoskali, często brakuje im skalibrowanego porównania ze standardem, aby sprawdzić, czy wyniki są prawidłowe dla dokładnych informacji w tej skali. Mikroskopia może precyzyjnie i konsekwentnie wskazywać to samo położenie pojedynczej cząsteczki lub nanocząsteczki. Jednocześnie jednak może być bardzo niedokładny, a położenie obiektu zidentyfikowanego przez mikroskop z dokładnością do jednej miliardowej metra może w rzeczywistości mieścić się w granicach jednej milionowej metra, ponieważ nie ma błędu.
Mikroskopy optyczne są powszechne wśród przyrządów laboratoryjnych i mogą z łatwością powiększać różne próbki, od delikatnych próbek biologicznych po urządzenia elektryczne i mechaniczne. Podobnie mikroskopy optyczne stają się coraz bardziej wydajne i przystępne cenowo, ponieważ łączą naukową wersję świateł i kamer w smartfonie.
Wspólne metody obserwacji mikroskopii optycznej
Metoda obserwacji interferencji różnicowej (DIC).
zasada
Światło spolaryzowane jest rozkładane na wiązki wzajemnie prostopadłe io równym natężeniu przez specjalny pryzmat, a wiązki przechodzą przez obiekt w dwóch bardzo bliskich punktach (mniej niż rozdzielczość mikroskopu), dzięki czemu występuje niewielka różnica faz, sprawiając, że obraz wydaje się trójwymiarowy Wrażenie trójwymiarowości.
cechy
Może sprawić, że kontrolowany obiekt wytworzy trójwymiarowy efekt stereoskopowy, a efekt obserwacji będzie bardziej intuicyjny. Nie jest potrzebny żaden specjalny obiektyw, działa lepiej z obserwacją fluorescencyjną i może dostosowywać zmiany koloru tła i obiektów, aby osiągnąć pożądany efekt.
metoda obserwacji w ciemnym polu
Darkfield to właściwie oświetlenie ciemnego pola. Jego charakterystyka różni się od charakterystyki jasnego pola. Nie obserwuje bezpośrednio światła oświetlenia, ale obserwuje światło odbite lub ugięte przez badany obiekt. Dlatego pole widzenia jest ciemnym tłem, podczas gdy badany obiekt prezentuje jasny obraz.
Zasada ciemnego pola opiera się na zjawisku Tyndalla w optyce. Kiedy pył przechodzi bezpośrednio przez silne światło, ludzkie oko nie jest w stanie go zaobserwować, co jest spowodowane dyfrakcją silnego światła. Jeśli światło pada na nią ukośnie, w wyniku odbicia światła, cząsteczka wydaje się powiększać i jest widoczna dla ludzkiego oka. Specjalnym akcesorium wymaganym do obserwacji w ciemnym polu jest kondensor ciemnego pola. Charakteryzuje się tym, że nie przepuszcza wiązki światła przez obiekt od dołu do góry, ale zmienia drogę światła tak, że pada ono ukośnie w kierunku obiektu, dzięki czemu światło oświetlające nie wpada bezpośrednio do soczewki obiektywu, i wykorzystuje odbicie lub dyfrakcję światła utworzonego przez powierzchnię obiektu Jasny obraz. Rozdzielczość obserwacji w ciemnym polu jest znacznie wyższa niż w przypadku obserwacji w jasnym polu, osiągając 0.02-0,004 μm.
