Różnica między mikroskopią dwufotonową a laserową mikroskopią konfokalną
Laserowy mikroskop konfokalny to zestaw systemów obserwacyjnych, analitycznych i wyjściowych, które wykorzystują laser jako źródło światła, sprzężoną zasadę ogniskowania i urządzenie oparte na tradycyjnym mikroskopie optycznym oraz cyfrowe przetwarzanie obrazu obserwowanego obiektu za pomocą komputera. Główne systemy obejmują laserowe źródła światła, automatyczne mikroskopy, moduły skanujące (w tym konfokalne kanały ścieżki optycznej i otworki, zwierciadła skanujące, detektory), cyfrowe procesory sygnałowe, komputery i urządzenia wyjściowe obrazu (wyświetlacze, drukarki kolorowe). Za pomocą laserowego skaningowego mikroskopu konfokalnego możliwe jest wykonanie tomografii i obrazowanie obserwowanej próbki. Dzięki temu możliwa jest obserwacja i analiza trójwymiarowej struktury przestrzennej komórek bez uszkodzeń.
Jednocześnie skaningowa mikroskopia konfokalna jest również potężnym narzędziem do dynamicznej obserwacji żywych komórek, wielokrotnego znakowania immunofluorescencyjnego i znakowania fluorescencyjnego jonów. Dokładnie analizuje istotę widma i rozróżnia sygnały z różnych etykiet o silnie nakładających się widmach emisyjnych.
Najważniejsze jest to, że w przypadku wielobarwnego barwienia fluorescencyjnego może całkowicie wyeliminować wpływ przesłuchu fluorescencyjnego, minimalizując jednocześnie utratę sygnału fluorescencji próbki. To wszystko, czego nie są w stanie osiągnąć zwykłe lustra.
Zależność ogniskowej obiektywu mikroskopu od okularu
Różne zasady
1. Mikroskop fluorescencyjny: Wykorzystuje światło ultrafioletowe jako źródło światła do oświetlania badanego obiektu, powodując emisję fluorescencji, a następnie obserwuje kształt i położenie obiektu pod mikroskopem.
2. Laserowy mikroskop konfokalny: Na podstawie obrazowania za pomocą mikroskopu fluorescencyjnego instaluje się laserowe urządzenie skanujące w celu wzbudzenia sond fluorescencyjnych za pomocą światła ultrafioletowego lub widzialnego.
Różne cechy
1. Mikroskop fluorescencyjny: używany do badania absorpcji, transportu, dystrybucji i lokalizacji substancji w komórkach. Niektóre substancje w komórkach, takie jak chlorofil, mogą emitować fluorescencję po wystawieniu na działanie promieniowania ultrafioletowego; Niektóre substancje same w sobie mogą nie emitować fluorescencji, ale zabarwione barwnikami fluorescencyjnymi lub przeciwciałami fluorescencyjnymi mogą również emitować fluorescencję w promieniowaniu ultrafioletowym.
2. Laserowy mikroskop konfokalny: wykorzystanie komputera do przetwarzania obrazu w celu uzyskania fluorescencyjnych obrazów wewnętrznej mikrostruktury komórek lub tkanek oraz do obserwacji sygnałów fizjologicznych, takich jak Ca2+, wartość pH, potencjał błonowy i zmiany w morfologii komórki na poziomie subkomórkowym.
