Główne elementy i funkcje laserowego mikroskopu konfokalnego
1. Otwór oświetleniowy
Funkcja: Spraw, aby światło lasera przeszło przez otwór oświetleniowy, tworząc punktowe źródło światła. Punktowe źródło światła ma unikalne zalety, takie jak silny kierunek źródła światła, mała rozbieżność, wysoka jasność, wysoka spójność przestrzenna i czasowa oraz wzbudzenie polaryzacji płaskiej. Tworzy urządzenie konfokalne z otworkiem detektora i płaszczyzną ogniskową.
2. Rozdzielacz wiązki
Funkcja: Oddziel fluorescencję wzbudzoną próbką od innego światła niesygnałowego.
3. Obiektyw
4. Płaszczyzna ogniskowa
Funkcja: Punktowe źródło światła laserowego napromieniowuje obiekt i skupia się na płaszczyźnie ogniskowej, a następnie pobudza oznaczoną fluorescencyjnie próbkę, aby wyemitowała fluorescencję i utworzyła plamkę ogniskową. Plamka świetlna jest przetwarzana przez szereg urządzeń, takich jak obiektyw i rozdzielacz wiązki, i skupiana odpowiednio na otworku oświetleniowym i otworku detektora. Stąd pochodzi znaczenie słowa konfokalny.
5. Detektor otworkowy
Funkcja: Odgrywaj rolę filtra przestrzennego. Rozproszone światło na płaszczyźnie nieogniskowej i rozproszone światło poza plamką nieogniskową na płaszczyźnie ogniskowania są w największym stopniu utrudniane, aby zapewnić, że wszystkie sygnały fluorescencji odbierane przez dziurkę detektora pochodzą z pozycji ogniskowej plamki próbki, a więc dyfrakcji i zbierania plam świetlnych na próbce oraz detekcji. Plamka obrazowania otworkowego detektora zawiera te same informacje (koniugat dwupunktowy).
6. Fotopowielacz (detektor)
Funkcja: Zaakceptuj sygnał świetlny przechodzący przez otworek, zamień go na sygnał elektryczny i prześlij do komputera, a na ekranie pojawi się wyraźny obraz całej płaszczyzny ogniskowej.
7. Lasery: Rozwój technologii mikroskopii konfokalnej jest nierozerwalnie związany z szybkim rozwojem laserów. W zależności od potrzeb badawczych możemy dobrać różne lasery. Takie jak ArUV (351,364 nm), HeCd (442 nm), AR (457 488 514 nm), ArKr (488 568 647 nm) Kr (568 nm), HeNe (543 nm), HeNe (633 nm) i tak dalej.
8. Kanał wielofluorescencyjny: Posiada wiele kanałów fluorescencyjnych umożliwiających wielokrotne znakowanie próbek w tym samym czasie.
