Istnieją dwa typy mikroskopów fluorescencyjnych w zależności od ich ścieżki światła.
1. Transmisyjny mikroskop fluorescencyjny: Źródło światła wzbudzającego przechodzi przez materiał próbki przez kondensator, aby wzbudzić fluorescencję. Powszechnie stosuje się kolektor ciemnego pola lub można zastosować zwykły kolektor, a reflektor jest dostosowany tak, aby odwracał i promieniował bocznie światło wzbudzenia na próbkę. To starszy mikroskop fluorescencyjny. Zaletą jest to, że fluorescencja jest silna przy małym powiększeniu, ale wadą jest to, że fluorescencja słabnie wraz ze wzrostem powiększenia. Dlatego lepiej jest obserwować większe próbki materiałów.
2. Mikroskop epi-fluorescencyjny to nowy typ mikroskopu fluorescencyjnego opracowany w czasach współczesnych. Różnica w stosunku do powyższego polega na tym, że światło wzbudzenia opada z soczewki obiektywu na powierzchnię próbki, co oznacza, że ta sama soczewka obiektywu jest używana jako kondensator oświetlenia i soczewka obiektywu do zbierania fluorescencji. Do ścieżki optycznej należy dodać dwukolorowy rozdzielacz wiązki, który w przypadku uranu optycznego stanowi 45%. Kąt, światło wzbudzenia odbija się od soczewki obiektywu i koncentruje na próbce. Fluorescencja generowana przez próbkę i światło wzbudzenia odbite od powierzchni soczewki obiektywu i powierzchni szkła nakrywkowego wchodzą jednocześnie do soczewki obiektywu i powracają do dichromatycznego rozdzielacza wiązki, tak że światło wzbudzenia jest oddzielone od fluorescencji, wzbudzenie resztkowe Światło jest następnie pochłaniane przez filtr blokujący. Jeśli używasz różnych wkładów z filtrem wzbudzenia/dwukolorowym rozdzielaczem wiązki/filtrem blokującym, możesz zaspokoić potrzeby różnych produktów reakcji fluorescencji. Zaletą tego rodzaju mikroskopu fluorescencyjnego jest to, że pole widzenia jest równomiernie oświetlone, obraz jest wyraźny, a im większe powiększenie, tym silniejsza fluorescencja.
(2) Jak korzystać z mikroskopu fluorescencyjnego.
1. Włącz źródło światła, a ultrawysokociśnieniowa lampa rtęciowa musi się rozgrzać przez kilka minut, aby osiągnąć najjaśniejszy punkt.
2. Transmisyjne mikroskopy fluorescencyjne wymagają zainstalowania wymaganego filtra wzbudzenia pomiędzy źródłem światła a kondensatorem oraz odpowiedniego filtra blokującego za soczewką obiektywu. Mikroskopy epifluorescencyjne wymagają włożenia wymaganego filtra wzbudzenia/dwukolorowego rozdzielacza wiązki/wkładki filtra blokującego w szczelinę ścieżki światła.
3. Obserwować za pomocą mikroskopu o małym powiększeniu i wyregulować środek źródła światła zgodnie z urządzeniami regulacyjnymi różnych modeli mikroskopów fluorescencyjnych tak, aby znajdowało się ono w środku całej plamki oświetlanej.
4. Umieść próbkę i wyreguluj ostrość, aby obserwować. Proszę zwrócić uwagę podczas użytkowania: Nie obserwuj filtra bezpośrednio oczami, aby uniknąć uszkodzenia oczu; obserwując preparat za pomocą soczewki olejowej, należy zastosować specjalną niefluorescencyjną soczewkę olejową; wysokoprężnej lampy rtęciowej nie można ponownie otworzyć natychmiast po jej wyłączeniu. Można go uruchomić ponownie po 5 minutach, w przeciwnym razie będzie niestabilny i wpłynie na żywotność lampy rtęciowej.
(3) Obserwuj pod mikroskopem fluorescencyjnym na platformie nauczania, używając niebiesko-fioletowego filtra światła. Można zauważyć, że przejście jest o. W komórkach barwionych barwnikiem fluorescencyjnym zawierającym 01% oranżu akrydynowego jądro i cytoplazma są wzbudzane w celu wytworzenia dwóch różnych kolorów fluorescencji (ciemnozielony i pomarańczowo-czerwony).
