Jakie są różnice między mikroskopią dwu-fotonową a laserową mikroskopią konfokalną?
Laserowy mikroskop konfokalny to zestaw systemów obserwacyjnych, analitycznych i wyjściowych, które wykorzystują laser jako źródło światła, sprzężoną zasadę ogniskowania i urządzenie oparte na tradycyjnym mikroskopie optycznym oraz cyfrowe przetwarzanie obrazu obserwowanego obiektu za pomocą komputera. System główny składa się z laserowego źródła światła, mikroskopu automatycznego, modułu skanującego (w tym kanału konfokalnej ścieżki optycznej i otworkowej, zwierciadła skanującego, detektora), cyfrowego procesora sygnałowego, komputera oraz sprzętu wyjściowego obrazu (wyświetlacz, kolorowa drukarka) itp. Przy użyciu laserowego skaningowego mikroskopu konfokalnego możliwe jest wykonanie tomograficznego skanowania i obrazowania obserwowanej próbki. Dzięki temu możliwa jest obserwacja i analiza-trójwymiarowej struktury przestrzennej komórek bez uszkodzeń.
Tymczasem laserowa skaningowa mikroskopia konfokalna jest również potężnym narzędziem do dynamicznej obserwacji żywych komórek, wielokrotnego znakowania immunofluorescencyjnego i obserwacji znakowania fluorescencyjnego jonów. Dokładnie analizuj istotę widm i rozróżniaj sygnały o silnie nakładających się widmach emisyjnych i różnych markerach.
Najważniejsze jest to, że w przypadku wielokolorowego-barwienia fluorescencyjnego może ono całkowicie wyeliminować wpływ fluorescencyjnego koloru krzyżowego i w największym możliwym stopniu zminimalizować utratę sygnału fluorescencji próbki. To wszystko, czego nie są w stanie osiągnąć zwykłe lustra świetlne.
Jaka jest zasada działania mikroskopu
Zasada działania mikroskopu polega na obrazowaniu za pomocą soczewki wypukłej. W optyce obraz powstały w wyniku zbieżności rzeczywistych promieni świetlnych, które można przedstawić na ekranie świetlnym, nazywa się obrazem rzeczywistym. Obraz powstały w wyniku zbieżności odwrotnej linii przedłużenia promieni świetlnych, którego nie można przedstawić na ekranie świetlnym, nazywa się obrazem wirtualnym. Omawiając różnicę między obrazami rzeczywistymi i wirtualnymi, często wspomina się, że obrazy rzeczywiste są odwrócone, podczas gdy obrazy wirtualne są pionowe.
Mikroskop składa się głównie z okularu, obiektywu, stolika i reflektora. Okular i obiektyw to soczewki wypukłe o różnych ogniskowych. Ogniskowa soczewki wypukłej obiektywu jest mniejsza niż ogniskowa soczewki wypukłej okularu.
Soczewka obiektywu jest odpowiednikiem soczewki projektora, a obiekty są odwracane i powiększane w rzeczywisty obraz przez soczewkę obiektywu. Okular jest odpowiednikiem zwykłego szkła powiększającego, a rzeczywisty obraz jest następnie przekształcany przez okular w pionowy i powiększony obraz wirtualny. Obiekty, które docierają do ludzkiego oka przez mikroskop, stają się odwróconymi, powiększonymi wirtualnymi obrazami.
