Metoda bezpośredniego liczenia drobnoustrojów
1. Rozcieńczanie
Odpowiednio rozcieńczyć zawiesinę drożdży piwnych. Jeśli roztwór bakterii nie jest stężony, nie ma potrzeby jego rozcieńczania.
2. Liczenie inspekcji lustrzanej
Przed dodaniem próbek należy przeprowadzić badanie mikroskopowe komory zliczającej tablicy liczącej. Jeśli jest brud, należy go oczyścić przed zliczeniem.
3. Dodaj próbki
Przykryj czystą i suchą płytkę do liczenia krwinek szkiełkiem nakrywkowym, a następnie za pomocą sterylnego zakraplacza z cienką końcówką upuść małą kroplę (nie za dużo) rozcieńczonych drożdży piwowarskich z krawędzi szkiełka nakrywkowego, umożliwiając wypłynięcie płynu bakteryjnego wejść do pokoju zliczania poprzez przenikanie kapilarne wzdłuż szczeliny. Ogólnie rzecz biorąc, pomieszczenie do liczenia można wypełnić płynem bakteryjnym. Uważaj, aby nie powstały bąbelki.
4. Liczenie pod mikroskopem
Po bezruchu na 5 minut umieść płytkę do liczenia krwinek na stoliku mikroskopu, najpierw użyj mikroskopu o małej mocy, aby zlokalizować komorę zliczania, a następnie przełącz płytkę do liczenia krwinek na mikroskop o dużej mocy. Jeżeli przed zliczeniem okaże się, że roztwór bakterii jest zbyt stężony lub zbyt rozcieńczony, przed zliczeniem należy ponownie skorygować rozcieńczenie. Ogólne wymagania dotyczące rozcieńczenia próbki wynoszą około 5-10 komórek bakteryjnych na małą siatkę. Wybierz 5 komórek z każdego pomieszczenia do liczenia (opcjonalnie 4 rogi i komórki środkowe) do zliczenia. Komórki bakteryjne znajdujące się na linii siatki są zazwyczaj liczone tylko na górnej i prawej linii. Kiedy drożdże wykiełkują, a pączek osiągnie połowę wielkości komórki macierzystej, przeprowadza się dwa zliczenia bakterii. Zliczanie próbki wymaga uzyskania wartości z dwóch komór zliczających w celu obliczenia zawartości bakterii w próbce.
5. Wyczyść hemocytometr
Po użyciu przepłucz hemocytometr słupem wody na kranie. Nie myć twardymi przedmiotami. Po umyciu wysuszyć na powietrzu lub suszarką do włosów. Badanie mikroskopowe i obserwacja, czy w każdej małej komórce znajdują się resztki bakterii lub innego osadu. Jeśli nie jest czysty, należy go wielokrotnie prać, aż będzie czysty.
