Uwagi i wskazówki dotyczące korzystania z kilku mikroskopów z kontrastem fazowym
1) Zainstaluj urządzenie do kontrastu fazowego: zdejmij soczewkę kondensora zwykłego mikroskopu i zainstaluj soczewkę kondensora z pierścieniową przysłoną na pasującym mikroskopie; wyjąć zwykłą soczewkę obiektywową mikroskopu i zastąpić ją soczewką obiektywową z płytką fazową; wymienić okular na okulary ogniskujące do mikroskopów z kontrastem fazowym; specjalne zielone filtry (czasami niepotrzebne) są umieszczane na wejściu światła do źródła światła.
2) Wyrównanie światła i ostrość: Wyreguluj okular ogniskowania i śrubę regulacji grubości, aż białe i czarne kółko będzie wyraźnie widoczne w polu widzenia. Czarne kółko jest nieruchome, a białe kółko można przesuwać, regulując śrubę na urządzeniu skraplacza, tak aby czarne kółko i białe kółko całkowicie się pokrywały. Zdejmij okular skupiający i zastąp go oryginalnym okularem mikroskopu, aby sprawdzić.
Analiza problemów związanych z użytkowaniem mikroskopu z kontrastem fazowym
1. Wpływ grubości próbki Podczas przeprowadzania obserwacji z kontrastem fazowym grubość próbki powinna wynosić 5 μm lub mniej. Podczas korzystania z grubszej próbki górna warstwa próbki jest bardzo wyraźna, ale głębsza warstwa będzie rozmyta i spowoduje zakłócenia przesunięcia fazowego. i rozpraszanie światła.
2. Wpływ szkiełka nakrywkowego i szkiełka podstawowego Próbkę należy przykryć szkiełkiem nakrywkowym, w przeciwnym razie jasny pierścień diafragmy pierścieniowej i ciemny pierścień płytki fazowej będą trudne do nałożenia. Obserwacja z kontrastem fazowym stawia również wysokie wymagania co do jakości szkiełka podstawowego i szkiełka nakrywkowego. Gdy występują rysy, nierówna grubość lub nierówności, wystąpią zniekształcenia jasnych pierścieni i zakłócenia fazowe. Ponadto, gdy suwak jest zbyt gruby lub zbyt cienki, jasny pierścień pierścieniowej membrany będzie się powiększał lub zmniejszał.
3. Efekt halo i blaknięcia W procesie obrazowania mikroskopu kontrastowo-fazowego, gdy struktura staje się ciemna z powodu opóźnienia fazowego, nie jest to utrata światła, ale efekt redystrybucji światła na płaszczyźnie obrazu. Tak więc światło, które najwyraźniej jest tracone w ciemnych obszarach, pojawi się jako jasna aureola wokół ciemniejszych obiektów. Jest to wada mikroskopii z kontrastem fazowym, która utrudnia obserwację drobnych struktur, a zjawisko halo jest poważniejsze, gdy diafragma pierścieniowa jest bardzo wąska. Innym zjawiskiem w mikroskopii z kontrastem fazowym jest efekt cieniowania, który odnosi się do utraty kontrastu na krawędziach większego obszaru z tym samym opóźnieniem fazowym, gdy jest obserwowany za pomocą kontrastu fazowego.
4. Odwrócenie fazy Kiedy n'n, kontrast jasnych i ciemnych obrazów jest dokładnie przeciwny, co nazywa się odwróceniem fazy. Jest nie do rozpoznania, gdy różnica faz δ=0, a kontrast staje się większy wraz ze wzrostem δ, a odwrócenie fazy pojawi się, gdy δ będzie nadal wzrastać do określonej wartości. Przy użyciu soczewki obiektywu o 90% wysokiej wartości absorbancji (wysoki kontrast) ta wartość przekształcenia wynosi około 0,55λ, a przy użyciu soczewki obiektywu o standardowej wartości absorbancji 70% wynosi ona około 0,33λ . Obiektywy o wyższych wartościach absorbancji powinny być używane do rozdzielania mniejszych różnic dróg optycznych.
