Wstępne badanie i regulacja mikroskopii fluorescencyjnej:
(1) Przed każdą obserwacją fluorescencji konieczne jest rutynowe sprawdzenie ułożenia żarnika, skupienia ścieżki optycznej, apertury apertury i ustawień apertury pola widzenia urządzenia fluorescencyjnego.
(2) Czy w konwerterze zainstalowano wymagane elementy filtra wzbudzenia/emisji fluorescencji, czy obiektyw mikroskopu fluorescencyjnego jest prawidłowo skonfigurowany oraz czy usunięto plamy oleju i kurz przed soczewką obiektywu.
(3) Podobnie, obserwując różnicę w świetle przechodzącym, należy sprawdzić sprzężenie soczewki skupiającej z centrum i pierścienia kontrastowego z soczewką obiektywu.
(4) Sprawdź, czy na nośniku próbki (szkiełku, szkiełku nakrywkowym i innych naczyniach) nie wisi płyn lub pył oraz czy grubość mieści się w zakresie odległości roboczej skalibrowanej przez obiektyw. Próbki pokrojone w plasterki nie powinny być zbyt grube, w przybliżeniu zalecane jest mniejsze lub równe 10 μm.
(5) Ze względu na obecność promieni ultrafioletowych w źródle światła, nad platformą załadunkową należy umieścić brązową osłonę przeciwsłoneczną, aby zapobiec uszkodzeniu siatkówki przez promieniowanie UV.
(6) Niestabilne napięcie może skrócić żywotność lamp rtęciowych wysokiego napięcia, dlatego do źródła zasilania źródła światła należy dodać regulator napięcia.
(7) Aby przedłużyć żywotność lampy rtęciowej, można ją wyłączyć dopiero po 15 minutach od włączenia; Po wyłączeniu zasilania świetlówki rtęciowej należy odczekać co najmniej 10 minut, aby po ponownym uruchomieniu opary rtęci schłodziły się do pierwotnego stanu, w przeciwnym razie będzie to miało wpływ na żywotność lampy.
Obserwacja obrazów z mikroskopu fluorescencyjnego:
(1) Po włączeniu źródła lampy fluorescencyjnej na około 5-10 minut intensywność wzbudzenia stabilizuje się i próbka jest ładowana do obserwacji; Aby zapobiec sytuacji, w której nadmierne wzbudzenie światła podczas ogniskowania i wyszukiwania obrazów spowoduje wygaszenie fluorescencji próbki, najpierw zmniejsza się aperturę mikroskopu fluorescencyjnego lub dodaje się filtr ND w celu dostosowania wzbudzenia do umiarkowanej intensywności, a stolik próbki przesuwa się regularnie. Po określeniu odbicia lustrzanego jest ono dostosowywane do stanu fluorescencji w celu rejestracji.
(2) Korekty związane ze słabą jakością obrazu. Niezbędne środki dostosowawcze, które można podjąć, z wyłączeniem czynników przygotowania próbki, to:
① Wyklucz urządzenia zacieniające lub ograniczające ze ścieżki optycznej obrazowania, takie jak akcesoria DIC, filtry ND itp.
② Wyreguluj ponownie ogniskowanie i przysłonę kolektora mikroskopu fluorescencyjnego.
③ Ostrożnie wyreguluj pierścień korekcji pokrycia obiektywu mikroskopu fluorescencyjnego.
